质粒DNA连接与转化方法详述

DNA连接酶催化两双链DNA片段相邻的5’-磷酸和3’-羟基间形成磷酸二酯键。在分子克隆中有用的DNA连接酶是来自Ｔ４噬菌体的DNA连接酶：T4DNA连接酶。T4DNA连接酶在分子克隆中主要用于：1、连接具有同源互补粘性末端的ＤＮＡ片段；2、连接双链DNA分子间的平端；3、在双链平端的DNA分子上添加合成的人工接头或适配子。目的DNA片段与载体DNA片段之间的连接方式（以T4DNA连接酶为例）主要有以下几种：（一）、具互补粘性末端片段之间的连接大多数的核酸内切限制酶都能够根据...

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牛冠状病毒抗体ELISA KIT样本处理方法

牛冠状病毒抗体ELISAKIT组成：30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶酶标试剂6ml×1瓶酶标包被板12孔×8条样品稀释液6ml×1瓶显色剂A液6ml×1瓶显色剂B液6ml×1/瓶终止液6ml×1瓶标准品（240pg/ml）0.5ml×1瓶标准品稀释液1.5ml×1瓶说明书1份封板膜2张密封袋1个本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中牛冠状病毒抗体水平。用纯化的牛冠状病毒抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被单抗的微孔中依次加入冠状病毒抗体，再与HRP标记的冠状病毒抗原结合，形成抗原-...

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雷帕霉素加速ALS模型小鼠的发病及可能机制

ALS运动神经元内蛋白质异常聚集可能是导致神经元选择性死亡的重要机制。自噬作为胞内蛋白质降解的主要途径，是现在蛋白质聚集类疾病的研究热点之一。自噬可能通过降解胞内聚集的蛋白质起到神经保护作用；但同时过度激活或者自噬途径的不完整可能加速神经元的死亡。而自噬在ALS发病过程及运动神经元选择性死亡中所发挥的作用今仍未有相关报道。科研人员利用经典的ALS转基因小鼠SOD1G93A小鼠，发现在转基因小鼠脊髓前角运动神经元内特异性自噬小体（AVs）数目增加，而且神经元轴突内增加要早于胞内...

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异柠檬酸脱氢酶作用机制研究新发现

分子细胞生物学研究室的研究人员发现一种异柠檬酸脱氢酶的基因突变产物诱发白血病和神经胶质瘤的作用机制。这一突破不仅揭示了人体代谢物的致癌之谜，也为神经胶质瘤等肿瘤的药物治疗提供了新的方向。此前的研究显示，一种异柠檬酸脱氢酶的基因变化，会产生一种名叫2HG的代谢物。当这种代谢垃圾积累到一定程度，就会引发代谢问题，促进正常细胞向癌细胞的转化。但2HG致癌的作用机制却是一个谜团，揭开这个谜团对于白血病和神经胶质瘤的发生及治疗具有重要作用。而新研究中发现，2HG的累积可以直接抑制生物酶...

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大鼠催乳素ELISA KIT操作程序

大鼠催乳素ELISAKIT性能：1.灵敏度：小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性：不与其它细胞因子反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。大鼠催乳素ELISAKIT试剂的准备：1.标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：500pg/ml（6号标准品）原倍浓度不用稀释直接加入50ul250pg/ml（5号标准品）100ul的原倍标准品加入100ul的...

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头孢菌素酰化酶的自剪切分子机制

日前科研人员结合晶体学数据，运用高分辨质谱分析技术对头孢菌素酰化酶空间肽的研究，为酶催化的动态机制提供了重要的实验证据。研究证实头孢菌素酰化酶第二步自剪切是由于分子内相互作用，并由N-端亲和基团（Ntn）催化完成。这一新催化模型的提出预示着在剪切过程中，该酶必须经历一个很大的构象变化，以克服距离约22?的空间障碍。此外，还揭示了头孢菌素酰化酶是一个酰化肽酶，并具有一定的外切肽酶活性，深入探讨了有关弱催化机制与分子内张力的相互关系，丰富了酶催化的理论知识。另外他们还运用现代分子...

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幽门螺旋杆菌的四大检测方法解析

幽门螺杆菌是一种单极、多鞭毛、末端钝圆、螺旋形弯曲的细菌。长2.5～4.0μm，宽0.5～1.0μm。革兰染色阴性。有动力。在胃粘膜上皮细胞表面常呈典型的螺旋状或弧形。在固体培养基上生长时，除典型的形态外，有时可出现杆状或圆球状。幽门螺杆菌是微需氧菌，环境氧要求5～8%，在大气或厌氧环境下不能生长。许多固体培养基可作幽门螺杆菌分离培养的基础培养基，布氏琼脂使用较多，但需加用适量全血或胎牛血清作为补充物方能生长。常以万古霉素、TMP、两性霉素B等组成抑菌剂防止杂菌生长。幽门螺旋...

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关于大豆磷脂的作用机理及相关信息介绍

大豆磷脂是一种混合磷脂，它是由磷脂酰胆碱（卵磷脂，简称PC，高等级为PPC）、磷脂酰乙醇胺（脑磷脂，简称PE）、磷脂酰肌醇（肌醇磷脂，简称PI）、磷脂酰丝胺酸（丝胺酸磷脂，简称PS）等成分组成，其中典型的是前三种。磷脂是人体细胞的基本成分，并对神经、生殖、激素等功有重要关系，具有很高营养价值和医用价值。现代人生活节奏紧张，磷脂营养大量流失，因此补充完整磷脂对现代人而言是必要。鉴于大豆磷脂类保健品是一种功能性的健康食品，虽然不是立即见效，但有著全面、长远、稳定的效果，同时又没有...

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