小鼠胚胎干细胞可分化成小脑神经细胞

日本理化研究所13日发布新闻公报称，该所研究人员成功诱导小鼠胚胎干细胞，有选择性地分化成小脑神经细胞，且实现了较高的分化效率。理化研究所发展生物学研究中心的研究小组，改进了此前培育大脑神经细胞的无血清浮游培养法，开发出一种能在试管内再现胚胎发育过程中小脑发育环境的新方法。公报说，小脑皮质中层内的浦肯雅细胞是掌管运动和学习的主要神经细胞，在医学方面具有相当重要的作用，以往诱导胚胎干细胞有选择性地分化成浦肯雅细胞的方法效率低下，只有约0.5％的胚胎干细胞终能分化成浦肯雅细胞。在实...

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揭示脱落酸替代小分子的功能及选择性机理

脱落酸（Abscisicacid,ABA）是植物中为重要的激素之一，它与植物生长发育和抗逆抗旱等生理过程都有极为密切的关系。2009年4月，美国和欧洲的两个研究组独立发现了一类被命名为PYR1/PYL/RCAR的蛋白可能为ABA受体。同年秋，颜宁教授的研究组和美国、日本、欧洲的其他四个研究组分别利用结构生物学和生物化学方法独立证实了这类蛋白就是ABA受体，并且揭示了其作用分子机制。ABA受体的发现与结构生物学鉴定被Science杂志评为2009年度突破之一。近期的Journa...

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Porcine HSP-70

FORRESEARCHUSEONLYAssayrange：20pg/ml-480pg/ml96determinationsPurposeThiskitallowsforthedeterminationofHSP-70concentrationsinPorcineserum,cellculturesupernatesａndotherbiologicalfluidsPrincipleoftheassayThekitassayPorcineHSP-70levelinthesampl...

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干细胞的原代提取

胚胎干细胞免疫学法是较为常用的分离方法，它可选择性地杀死囊胚外层的滋养层细胞，而仅保留ICM。它的原理是先将胚泡与抗小鼠的血清共同孵化一段时间后，然后加入补体，在补体的作用下，外层的滋养细胞发生溶解，而ICM则不受影响。神经干细胞目前，神经干细胞的分离方法主要有三种：无血清培养基自然筛选法、流式细胞术分选法、免疫磁珠分选法。无血清培养基自然筛选法是迄今应用为广泛，也是简单和容易操作且行之有效的方法。其原理是利用特殊的培养基使成熟的神经细胞无法较长时间地成活，而分离筛选出能够在...

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胚胎干细胞培养标准化操作规程

一般培养——维持ES细胞处于未分化状态ES细胞培养用含有ESGRO（白血病抑制因子）的高糖培养基来阻止细胞的分化。为细胞提供包被有0.1％明胶的平板作为粘附细胞的基质。建议每2－3天从达到80％－90％融合的平板按1：8的比率传代细胞一次，细胞传代以后，在将细胞接种在0.1％明胶包被的培养皿之前，通过预先将细胞接种在没有经过包被的组织培养板2个小时，使分化细胞粘附，从而将分化和未分化细胞分开。将细胞全程置于37℃，5％CO2，100％湿度条件下培养。培养基ES:配制一20×不...

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大肠杆菌转化时免热激及孵育的方法

中山大学的徐晓鹏博士向大家介绍了一种质粒转化大肠杆菌时免热激及孵育的方法。背景：目前外源质粒转化大肠杆菌的步骤，需要先将质粒和感受态细胞在冰上抚育半小时，然后42度热激90秒，加液体培养基缓摇1个小时左右再离心涂板。其中热激步骤温度和时间要求严格，热激后大量菌细胞死亡，还要经过液体培养基抚育才能涂板。方法改进：我们可以在做质粒和感受态细胞在冰上抚育的同时，将要涂的平板放在37度培养箱里，当抚育结束后，立即涂到已经加热到37度的平板上，利用培养板的热度代替热激，平板可以直接放回...

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蛋白质（酶）的提取

大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液，少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂中，因些，可采用不同溶剂提取分离和纯化蛋白质及酶。1.有机溶剂提取法一些和脂质结合比较牢固或分子中非极性侧链较多的蛋白质和酶，不溶于水、稀盐溶液、稀酸或稀碱中，可用乙醇、丙酮和丁醇等有机溶剂，它们具的一定的亲水性，还有较强的亲脂性、是理想的提脂蛋白的提取液。但必须在低温下操作。丁醇提取法对提取一些与脂质结合紧密的蛋白质和酶特别*，一是因为丁醇亲脂性强，特别是溶解磷脂的能力强；二是...

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大鼠I型胶原（collagen I）酶联免疫分析试剂盒使用说明书

检测范围：96T20ug/L-800ug/L使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中I型胶原（collagenI）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠I型胶原（collagenI）水平。用纯化的大鼠I型胶原（collagenI）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入I型胶原（collagenI），再与HRP标记的I型胶原（collagenI）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP...

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