免疫学产品ELISA终止液的相关知识普及

免疫学产品ELISA终止液是一种主要用于ELISA等实验中TMB显色反应终止的比较安全的不含硫酸的即用型酸性溶液。加入本产品后，TMB显色反应会被终止，并且原来的蓝色溶液会并转变成在450nm处有较强光吸收的黄色溶液，从而在450nm测定吸光度并且可以使检测灵敏度比检测蓝色吸光度提高1倍左右。本产品相对比较安全，但由于其腐蚀性*而有较大的安全隐患。本产品不含硫酸，使用了相对更加安全的适当中强酸，可以有效避免硫酸的强腐蚀性可能对人体造成的伤害。需要注意的是本产品作为中强酸，虽然...

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PCR定量试剂盒进行引物探针确定的指标分析

PCR定量试剂盒前期的验证引物探针性能和确定适反应条件是确保正式实验顺利进行的前提。那么前期验证引物探针我们需要怎么确定呢？主要指标是基线、扩增曲线、Ct值、扩增效率、低浓度样本检出、CV等。一、基线基线是PCR扩增曲线中水平的线，在PCR扩增反应的循环中，荧光信号变化不大，成一条直线，这条直线即基线。在PCR定量试剂盒引物探针筛选时，要注意基线是否水平。引物探针浓度纯度都会影响基线，如导致基线上抬，下降等。而基线也是一个很直观的指标。二、扩增曲线另一个直观地指标是扩增曲线形...

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记住这些知识点，你能也操作FITC荧光标记抗体

FITC荧光标记抗体是目前较为常用的标记抗体的方法，FITC一般呈黄色、褐色或褐黄色粉末或结晶，性质稳定在低温中能保存数年。在碱性条件下，FITC的碳酰胺键可与抗体蛋白上的赖氨酸氨基共价结合，形成FITC-蛋白质结合物，即荧光抗体或荧光结合物。一个抗体分子上能标记15~20个FITC分子，被标记的抗体仍能保持与相应抗原结合的能力，在荧光灯源紫外线或蓝紫光激发下产生黄绿色荧光，通过荧光显微镜进行观察或利用流式细胞仪分析，从而对抗原进行定性、定位或定量。下面就跟随小编一起来了解其...

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操作需谨慎，WB实验时需要注意这些！

WB实验，蛋白质印迹又称免疫印迹，是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。常用于鉴定某种蛋白，并能对蛋白进行定性和半定量分析。实验原理：一个基因表达结果是产生相应的蛋白质(或酶)。因此，检测蛋白质是测定基因表达的主要标志，检测蛋白质的方法很多，除ELISA法外，也可用与检测DNA和RNA相类似的吸印方法。而样本制备是WB实验的开始也是重要的一步，它的操作虽然并不复杂，却有很多需要注意的细节。根据实验需要的目标蛋白的不同，大致可以分为三种：总蛋白、膜蛋白和核蛋...

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白细胞稀释液的操作过程

白细胞稀释液是一种应用在血液检测过程中的试剂，白细胞稀释液是一种具有酸碱缓冲作用、恰当的离子强度和电导率的电解质平衡液。当用于稀释待测血样时，其适当的离子强度能再一定时间内完整地保持血细胞原来的体积，而其合适的电导率能保证获得与细胞体积相应的脉冲大小，保证测量结果准确。采用的原理是将血液用稀释液作定量稀释后，红细胞*溶解，注入计数池在显微镜下计数，然后计算出血液中白细胞数。白细胞稀释液的操作过程：1、小试管1支，加白细胞稀释液0.38ml。2、用微量吸管准确吸取末稍血20μl...

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碱性固绿染色液的使用步骤

不同的氨基酸带有不同化学性质的侧链基团，有的带有碱性侧链，有的带有酸性侧链，由此组成的蛋白质具有不同数目的碱性基团和酸性基团，这些基团会使蛋白质在不同的pH溶液中带有不同的净电荷，整个蛋白质分子带正电荷多，即为碱性蛋白。碱性固绿染色液是利用碱性蛋白质与带有负电荷的碱性染料固绿结合进行染色，细胞中含量最为丰富的碱性蛋白为组蛋白，主要存在于细胞核中，因此染色后细胞核大部分被染成绿色。使用步骤：1.取新鲜血液1滴滴于载玻片一端，推片，室温晾干。2.涂片浸入70%乙醇中固定5min，...

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草酸铵结晶紫染色液的介绍

草酸铵结晶紫染色液是革兰氏染色法中的一种成分,主要由草酸铵、结晶紫、乙醇等组成。革兰阳性菌染色中,细胞经草酸铵结晶紫染色后再经Gram碘液处理，形成不溶性复合物，该复合物不能通过细胞壁,不易被脱色,所以保持紫色。染色后细菌与环境形成鲜明对比，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。草酸铵结晶紫染色液是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成深紫色的染色液。用于革兰氏染色。结晶紫是一种碱性染料，可以和细胞核中的DNA结合，可以与细胞核中的核酸结合把核染...

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那些年对于ELISA试剂盒检测数据的疑惑

“隔壁的实验室又发了3篇SCI文章，我们还在处理数据，这几家的试剂盒检测数据怎么都不一样？”小编每当听到这句话，每次感受都不同。对那些努力钻研数据的学者、那些把青春献给实验室的研究生们表示深深的同情。那么，造成试剂盒检测数据不一样的原因，除了一些实验操作、实验环境等客观因素外，还有试剂盒质量参数，如重复率、板内差、板间差、线性稀释、回收率等。但是，最重要的影响因素可能是作为检测标尺的标准品。所以，下面我们就揭晓影响不同ELISA试剂盒检测数据的差异和关于标准品的几个疑惑。不同...

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