western blot样品制备注意事项及步骤

westernblot样品制备注意事项及步骤WesternBlot样品制备是这个关键步骤，要求尽可能的获得所有蛋白质。所以我们在做wtsternblot实验应注意以下问题：1：在合适的盐浓度下，应保持蛋白质的大溶解性和可重复性。2：选择合适的表面活性剂和还原剂，破坏所有非共价结合的蛋白质复合物和共价键二硫键，使其形成一个各自多肽的溶液。3：尽量去除核酸，多糖，脂类等干扰分子。4：防止蛋白质在样品处理过程中的人为的修饰，制备过程应在低温下进行，以避免细胞破碎释放出的各种酶类的修...

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蛋白marker发展史

蛋白marker发展史蛋白分子量标准，常称之为蛋白Marker。在免疫印迹（Westernblot）试验中，分子量Marker虽不起眼，但意义重大，是阳性对照，是大小的标准，是必须的。只有Marker无误了，实验结果才有说服力。除此之外，蛋白Marker还能够提示电泳是否正常，转移是否成功等信息。光阴似箭，日月如梭，不知不觉中蛋白Marker经历了普通Marker、预染Marker和曝光Marker三个发展阶段。1.0代产品：普通蛋白Marker普通蛋白Marker，或称之为...

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细胞冻存与复苏操作步骤与注意事项

细胞冻存与复苏操作步骤与注意事项文档细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞，可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用。一、原理在不加任何条件下直接冻存细胞时，细胞内和外环境中的水都会形成冰晶，能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、PH改变、蛋白变性等，能引起细胞死亡。...

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表面活性剂的作用有哪些

表面活性剂的作用有哪些表面活性剂(surfactant)，是指加入少量能使其溶液体系的界面状态发生明显变化的物质。表面活性剂分为离子型表面活性剂（包括阳离子表面活性剂与阴离子表面活性剂）、非离子型表面活性剂、两性表面活性剂、复配表面活性剂、其他表面活性剂等。那么表面活性剂的作用是什么呢？表面活性剂的作用（1）乳化作用：由于油脂在水中表面张力大,当水中滴入油脂后,用力搅拌,油脂被粉碎成细珠状,互相混合成乳浊液,但搅拌停止又重新分层.如果加入表面活性剂,用力搅拌,停止后很长时间内...

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维生素C：大航海时代的荣耀

维生素C：大航海时代的荣耀大航海时代是西方的人到世界各处淘金的时代，小船和大海之间里辨不清情结，割舍不断的爱恋。在这你恬静，我欣喜；你愤怒我忐忑的年代中，在船上工作的船员们受到了各种厄难的威胁，这里我们来聊聊病魔主宰之坏血病的兴衰吧。曾经叱咤大海，威震时代的一代霸主--坏血病也难以逃脱被治的厄运。那什么是坏血病呢？这是百科解释：维生素C缺乏后数月，患者感倦怠、全身乏力、精神抑郁、多疑、虚弱、厌食、营养不良、面色苍白、轻度贫血、牙龈肿胀、出血，并可因牙龈及齿槽坏死而致牙齿松动、...

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25格×16格的血球计数板使用方法介绍

25格×16格的血球计数板使用方法介绍血球计数板介绍用厚玻璃制成。每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。计数池两侧各有一支持柱，将特制的盖玻片覆盖其上，形成高0.10mm的计数池。计数池画有长、宽各3.0mm的方格，分为9个大方格，每个大格面积为1.0mm。容积为0.1mm3（ul），其中，中央大方格用双线分成25个中方格，位于正中及四角5个中方格是红细胞计数区域，用单线划分为16个小方格。四角的4个大方格是白细胞计数区域，用单线划分为16个中方格。根椐标准局（NBS）规...

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内毒素鲎实验，如何消除样品干扰？

内毒素鲎实验，如何消除样品干扰？在鲎试剂检验内毒素试验中有些样品严重干扰鲎试验生化反应，甚使反应不能进行。这就需要采用特殊方法对样品进行预处理。1稀释法相当大一部分样品的干扰因素在一定浓度下才起作用，把样品适量稀释后即可按常规方法测定。如甘露醇、庆大霉素、人血白蛋白、肝素钠和维生素C等注射液等。2加热法有些干扰因素为不耐热的物质，将样品在适当温度下保温一段时间，即可按常规方法测定。如某些血液制品和生物药品等。3调整pH值法有些样品PH值偏高或偏低，且鲎试剂中pH缓冲剂不能将反...

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RNA的提取方法大总结

RNA的提取方法大总结这篇文章主要讲的是几种常用的RNA提取方法。1、异硫氰酸胍氯化铯超速离心法原理：使用蛋白质变性剂异硫氰酸胍有效抑制RNA酶的活性，经过起始密度为1.78g/ml的氯化铯介质，进行密度梯度超速离心，RNA沉淀于管底，而DNA与蛋白质在上清中。使用这种方法，不但能得到高质量的RNA，而且能同时分离出细胞染色体DNA.本法对于冷冻时间长、细胞质和细胞核不易分离的组织标本以及富含RNA酶的组织细胞（如胰腺）的RNA提取尤其适合。此法提取的RNA的质量好和成功率高...

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