2017-23
甘氨酸同Tris(三羟甲基氨基甲烷)一起组成电泳缓冲液中的缓冲对,可以稳定电泳过程中的PH值。在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比,这一区带便形成了较高的电压梯度,压着蛋白质...
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2017-111
Parafilm封口膜具有柔软性,可塑性,防止水分流失,自动密封性,无味,容易切割,热塑性塑料,半透明,无色等特点。可以快速有效地密封实验器皿。具有防水防湿的性能,有效阻止样品发挥和污染。有效保护无水物质。可以重复折叠使用,缠绕在尖锐外形物体上也不会被撕裂。具有良好韧性,21℃时也可拉伸接近两倍的长度。随温度身高,绕韧性和柔软度相应提升。不耐高温,68℃时将会软化具有粘性。物理性质:Parafilm封口膜是半透明的,有柔性的,热塑性塑料,高性能防水材料,本身为无色,无嗅,无味...
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2016-1222
植物蛋白质提取方法总汇植物蛋白是蛋白质的一种,来源是从植物里提取的,营养与动物蛋白相仿,但是更易于消化。含植物蛋白丰富的是大豆。但在饮食中,植物蛋白和动物蛋白要搭配食用。植物蛋白尽管一般不如动物蛋白好,但仍是人类膳食蛋白质的重要来源。谷类一般含蛋白质6%-10%,不过其中必需氨基酸种或多种含量低(限制氨基酸)。薯类含蛋白质2%-3%。某些坚果类如花生、核桃、杏仁和莲子等则含有较高的蛋白质(15%-30%)。豆科植物如某些干豆类的蛋白质含量可高达40%左右。特别是大豆在豆类中更...
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2016-1221
2016-125
RNAwait是一种无毒的可直接使用的样品储存液,能使细胞内的RNA与RNA酶分离,可以快速可靠地保存动物组织、细胞内的RNA。组织获取后立即浸入RNAwait保存液中,在室温可以保存7天,4℃可以保存4周,-20℃、-80℃标本可以长期保存,RNA稳定存在不降解,取出后用各类方法抽提可以获得高质量的RNA。操作流程:1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1mlRNAwait)。2.将RNA...
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2016-122
Tris饱和酚是用Tris-HCl(pH8.0)饱和过的重蒸酚,为浅黄色透明液体,有刺激性气味,上层为Tris盐酸缓冲液,pH7.8,下层为酚相,内加有抗氧化的8-羟基喹啉。Tris饱和酚用于分离DNA。Tris饱和酚的配置:冰箱取出重蒸酚,室温放置,之后68度水浴溶化,切勿立即放入68度的水浴中,以防玻璃炸裂,加8-羟基喹啉0.1%和β-巯基乙醇0.2%,(原液14.4MOL/ML),混匀,溶液呈现黄色,倒入分液漏斗中(也可在烧杯中进行)加入等溶剂的1MOL/ML的Tris...
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2016-1116
单克隆技术又名杂交瘤技术。由G.KÖhler和Milstein1975年创立。主要原理是利用产生抗体的B细胞与肿瘤细胞杂交融合成杂交瘤细胞,生产抗体。单克隆抗体的制备过程主要有以下六个环节,具体为抗原指标、免疫动物选择、免疫程序的确定、免疫、细胞杂交与选择培养。下面详细介绍单克隆抗体制备过程每一步的做法。1、抗原制备制备单克隆抗体的免疫抗原,从纯度上说虽不要求很高,但高纯度的抗原使得到所需单抗的机会增加,同时可以减轻筛选的工作量。因此,免疫抗原是越纯越好,应根据所研究的抗原和...
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2016-1115
内参抗体种类很多,比如beta-actin、beta-tubunlin、GAPDH、α-tubunlin等,那么针对自己的实验,我们该如何选择呢?下面简单介绍下选择内参抗体应遵循的原则:一.样本种属来源:先要考虑的就是实验样本来源于什么物种。1、哺乳动物的组织或者细胞样本,通常选择β-actin、β-tubulin、GAPDH、LaminB、HistoneH3、Na,Katpase等。2、植物来源实验样本,则可以选择plantactin、Rubisco等。3、其他来源样本研究...
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