western blot的原理及应用

Westernblot法即是一种将电泳与KIJSA结合起来的技术，可分为电泳、转印、酶免疫测定3个阶段。Westernblot法结合了电泳的高分辨率和酶免疫测定的高敏感性和特异性，是一种能用于分析样本组分的免疫学测定方法。westernblot的作用与SouthernBlot或NorthernBlot杂交方法类似，但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤...

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核酸纯化的原理

核酸抽提与纯化是分子生物学试验的基础，核酸纯化方法是影响提取核酸质量高低的重要因素，也是下游分子生物学试验成败的关键。核酸纯化的方法及原理如下：一、PC抽提法PC抽提是去除蛋白质有效的手段，但超过了该饱和度，裂解体系中的蛋白质不会被一次去除，必须靠多次抽提，方可*去除。且每次抽提都会损失部分核酸。另外，体系太粘稠的坏处是，蛋白质难以*去除，以及基因组DNA会断裂得更厉害，所以要注意裂解液与样品的比例。PC抽提的另外一个用途是，利用酸性酚可以部分去除DNA的特点，在RNA抽提时...

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DMEM培养基的使用方法及特点

DMEM是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基，高糖型有利于细胞停泊于一个位置生长，适于生长较快、附着较困难肿瘤细胞等。该类培养基广泛应用于疫苗生产和各种初代病毒宿主细胞的细胞培养及单一细胞培养;如A9、3T6、BALB/3T3、COS-1、COS-3、COS-7、L6、WEHI-3b等细胞系的培养。DMEM培养基的成分DMEM培养基的配制方法：1制备新鲜三蒸水或超纯水。2称取所需量的干粉培养基，加入约终体积一半的三蒸水中;若配制一个包装的培养液，在将整个包装的干粉倒入三蒸水后，...

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细胞培养血清的作用及分类

血清，指血液凝固后，在血浆中除去纤维蛋白分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用。牛血清是细胞培养中用量大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,具有极为重要的功能.细胞培养血清的作用1.在细胞培养中提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物.2.提供结合蛋白,能识别维生素、...

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简述细胞培养的步骤

细胞培养技术也叫细胞克隆技术，在生物学中的正规名词为细胞培养技术。现代生物技术一般认为包括基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术和发酵工程技术，而这些技术的发展几乎都与细胞培养有密切关系，特别是在医药领域的发展，细胞培养更具有特殊的作用和价值。以下来具体讲一下细胞培养的步骤。细胞培养的步骤一、细胞复苏：1.将新鲜培养基置于37℃水浴锅中回温，回温后喷以75%酒精并擦拭之，移入无菌操作台内。如配置：50mL*培养基(含10%FBS，1%青链霉素双抗)44.5mL基础培养基+5m...

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细胞培养瓶规格及各种形状使用方法

细胞培养瓶，主要用来培养细胞的。一般根据瓶子容积细胞培养瓶规格有5500ml供选择。根据材质可以分为玻璃的和塑料的，底部形状有正方形、长方形、三角形等，根据瓶子容积有5500ml供选择。另外，表面经过特殊改性处理后，可以让细胞更好的进行贴壁培养，这样根据细胞贴壁面积又可以分为25～175cm2多种。国产的细胞培养瓶一般盖子都是封闭的，不带内垫，常用于密闭培养，可保证其密闭性;进口的培养瓶的盖子样式比较多：密闭盖、聚酯盖、透气盖、隔垫盖等。密闭盖的性能和国产的是相同的，聚酯盖常...

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比色皿的使用和清洗

比色皿透光面是由能够透过所使用的波长范围的光的材料制成。在200-350nm工作的比色皿适用于紫外区,必须使用石英或熔熔硅石制成透光面的石英比色皿。(注：熔熔硅石的俺还真没见过，只用过石英的，哪位板油要是有的话，一定要让俺看看，开开眼界啊)石英比色皿既可用于紫外区又可用于可见区，但是价格一般比较贵哦，所以要根据使用波长选择比色皿，如果不用紫外区的话，用普通玻璃比色皿就行了，一则浪费没必要，二则，嘿嘿，摔碎了也不心疼，哈哈。而普通硅酸盐光学玻璃制成的透光面的比色皿,只能用于35...

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表面活性剂的使用原理

表面活性剂就是通过降低反应物质表面的活化能，促进物质表面活化的一种活化剂。一类能降低液体表面张力的试剂.通常在分子内含有一个疏水基团和一个亲水基团,如去垢剂、乳化剂、消泡剂等.表面活性剂的原理表面活性剂的工作原理就是一个火柴棍结构的模式，表面活性剂的结构类似一根火柴棍,火柴头就是亲水端,火柴杆就是亲油端.亲油端插入油污分子内部,相似相容；亲水端跟水分子结合形成胶束团.这样,再经过机械摩擦运动,就将油污分子疏松开来,拉进水中,从而达到膨化、溶解、扩散、洗涤油污的目的.表面活性剂...

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