膜再生液的配制方法以及注意事项

膜再生液可在不影响抗原蛋白的情况下清除膜上结合的抗体。随后，可以使用不同的抗体进行下一轮WesternBlot实验。一般stripping的原理都是利用蛋白变性以及利用beta-mercaptoethanol打开-s-s-，使一抗二抗解聚变性而被洗去，但洗脱的强度是一个关键，小了抗体洗不干净影响re-probe，大了又造成抗原的损失。膜再生液的配制：方法一：需要50℃温浴）StrippingBuffer:β-mercaptoethanol342μl；20%SDS5ml；1MT...

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4%多聚甲醛怎么配

多聚甲醛(Paraformalclehyde)又称固体甲醛，是一类线型短链的聚氧甲撑二醇HO(CH2O)nH(式中的n=8--100)混合物，其中还含有少量水份和甲醇。多聚甲醛性状为甲醛的固体聚合物。白色无定型粉末，有辛辣气味。其配制方法如下：（1）4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.3）试剂：多聚甲醛40g0.1mol/L磷酸缓冲液1000ml配制方法：称取40g多聚甲醛，置于三角烧瓶中，加入500～800ml0.1mol/L磷酸缓冲液（PhosphateBu...

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电极缓冲液中甘氨酸的作用

甘氨酸同Tris（三羟甲基氨基甲烷）一起组成电泳缓冲液中的缓冲对，可以稳定电泳过程中的PH值。在SDS-PAGE不连续电泳中，制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统，浓缩胶是pH6.7，分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中，其pH环境呈弱酸性，因此甘氨酸解离很少，其在电场的作用下，泳动效率低;而CL离子却很高，两者之间形成导电性较低的区带，蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比，这一区带便形成了较高的电压梯度，压着蛋白质...

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Parafilm封口膜怎么使用

Parafilm封口膜具有柔软性，可塑性，防止水分流失，自动密封性，无味，容易切割，热塑性塑料，半透明，无色等特点。可以快速有效地密封实验器皿。具有防水防湿的性能，有效阻止样品发挥和污染。有效保护无水物质。可以重复折叠使用，缠绕在尖锐外形物体上也不会被撕裂。具有良好韧性，21℃时也可拉伸接近两倍的长度。随温度身高，绕韧性和柔软度相应提升。不耐高温，68℃时将会软化具有粘性。物理性质:Parafilm封口膜是半透明的，有柔性的，热塑性塑料，高性能防水材料，本身为无色，无嗅，无味...

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植物蛋白质提取方法总汇

植物蛋白质提取方法总汇植物蛋白是蛋白质的一种，来源是从植物里提取的，营养与动物蛋白相仿，但是更易于消化。含植物蛋白丰富的是大豆。但在饮食中，植物蛋白和动物蛋白要搭配食用。植物蛋白尽管一般不如动物蛋白好，但仍是人类膳食蛋白质的重要来源。谷类一般含蛋白质6%-10%，不过其中必需氨基酸种或多种含量低（限制氨基酸）。薯类含蛋白质2%-3%。某些坚果类如花生、核桃、杏仁和莲子等则含有较高的蛋白质（15%-30%）。豆科植物如某些干豆类的蛋白质含量可高达40%左右。特别是大豆在豆类中更...

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转铁蛋白应用

转铁蛋白（Transferrin）Cas；11096-37-0转铁蛋白是血液中一种主要的糖蛋白,负责将肝组织(是铁贮藏的主要场所)的铁向其它组织的细胞运输。没有结合铁的转铁蛋白称作脱铁转铁蛋白(apotransferrin),它能够紧紧结合两个Fe3,此时称为铁结合转铁蛋白(ferrotransferrin)。所有生长中的细胞表面都有铁结合转铁蛋白的受体,在中性pH条件下转铁蛋白与铁结合,然后通过内吞作用进入细胞。在细胞内,在内体的酸性环境下,转铁蛋白释放出铁,但是仍与膜受体...

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RNAwait（非冻型组织RNA保存液）

RNAwait是一种无毒的可直接使用的样品储存液，能使细胞内的RNA与RNA酶分离，可以快速可靠地保存动物组织、细胞内的RNA。组织获取后立即浸入RNAwait保存液中，在室温可以保存7天，4℃可以保存4周，-20℃、-80℃标本可以长期保存，RNA稳定存在不降解，取出后用各类方法抽提可以获得高质量的RNA。操作流程：1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1mlRNAwait）。2.将RNA...

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Tris饱和酚配制及作用

Tris饱和酚是用Tris-HCl（pH8.0）饱和过的重蒸酚，为浅黄色透明液体，有刺激性气味，上层为Tris盐酸缓冲液，pH7.8，下层为酚相，内加有抗氧化的8-羟基喹啉。Tris饱和酚用于分离DNA。Tris饱和酚的配置：冰箱取出重蒸酚,室温放置，之后68度水浴溶化,切勿立即放入68度的水浴中，以防玻璃炸裂，加8－羟基喹啉0.1％和β－巯基乙醇0.2％,（原液14.4MOL/ML），混匀，溶液呈现黄色，倒入分液漏斗中（也可在烧杯中进行）加入等溶剂的1MOL/ML的Tris...

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