2016-513
RIPA裂解液(RIPALysisBuffer)对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用,RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。RIPA裂解液的原理如下:RIPA主要是从动物组织和动物细胞中抽取的可溶性蛋白。RIPA组织/细胞裂解液是利用表面活性剂等来裂解细胞膜(包括核膜)。索莱宝RIPA裂解液的使用方法如发现RIPA有沉淀,请放室温半小时或者常温水浴使沉淀溶解。根据使用量,取每1mlRIPA加入10ulPMSF,使PMSF的终浓度为1m...
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2016-513
2016-513
2016-513
瑞氏染色法是从经典和常用的染色法。是染料透入被染物并存留其内部的一种过程,此过程既有物理的吸附作用,又有化学的亲和作用,各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力也不一样。因此,染色后同一血片上各种细胞可以染上各自特征性的颜色。在瑞氏染色的过程中也有一些注意事项。瑞氏染色的注意事项1.血涂片干透后固定,否则细胞在染色过程中容易脱落。2.冲洗时应以流水冲洗,不能先倒掉染液,以防染料沉着在血涂片上。冲洗时间不能过久,以防脱色。如血涂片上有染料颗粒沉积,可滴加甲醇,然后立即用流水...
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2016-59
蛋白marker的作用是什么,先要要了解一下什么是蛋白marker。在WesternBlot过程中,分子量Marker就像个螺丝钉一样没虽然是个小细节,然而就是这样一个小细节对实验结果有着不可忽视的作用。蛋白marker的作用:Marker是表面覆盖有特殊反光材料的标记物,常见形状有球形、半球形。染色体上一个可以被识别的区域(比如限制性内切酶的酶切点,基因的位置等)。标记的遗传能够被检测出来。标记可以是染色体上有表达功能的部分(比如基因),也可以是没有编码蛋白质功能但遗传特性...
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2016-59
蛋白marker可分为未预染的Marker即宽分子量蛋白标准、高分子量蛋白标准以及低分子量蛋白标准以及预染的Marker即单色预染和多色预染。那么,什么是预染蛋白marker?预染蛋白marker为一些纯化好的蛋白的混合物.这些蛋白混合物与一种蓝色染料共价偶联.可在凝胶电泳时出现强度均匀的8条带.同未预染的蛋白marker相比,预染蛋白marker因与染料共价偶联而在SDS-PAGE电泳时的迁移特性发生某些改变.预染蛋白分子量标准预染蛋白分子量是一些纯化好的蛋白混合物,通过与...
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2016-59
磷酸缓冲液也叫做磷酸盐缓冲液,英文名为PhosphateBuffer,是生物化学研究中使用为广泛的一种缓冲液,磷酸缓冲液的配制我们一起来了解一下。先,按照下表所给定的体积,混合1mol/L的磷酸二氢钠(单碱)和1mol/L磷酸氢二钠(双碱)贮液,获得所需pH的磷酸缓冲液。配制1mol/L的磷酸二氢钠(NaH2PO4?H2O)贮液:溶解138g于足量水中,使终体积为1L;1mol/L磷酸氢二钠(Na2HPO4)贮液:溶解142g于足量水中使终体积为1L。1mol/L磷酸二氢钠(...
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2016-59