2016-56
要知道MTT法检测细胞活性步骤先要知道MTT是什么?MTTMTT是一种粉末状化学试剂,全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,汉语化学名为3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。MTT法检测细胞活性原理检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此...
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2016-54
琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品,如大分子核酸、病毒等,一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。琼脂糖凝胶电泳常见为题都有哪些?、一、DNA带模糊、1、DNA降解:琼脂糖凝胶电泳试验中要避免核酸酶污染2、电泳缓冲液陈旧:电泳缓冲液多系使用后,离子强度降解,PH值上升,缓冲能力减弱,从而影响电泳实验,建议经常更换电泳缓冲液。3、所用电泳条件不合适:电泳时电压不应超过20V/cm,温度4、DNA上扬量过多:应减少凝胶中DNA上样量。...
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2016-54
2016-54
琼脂糖凝胶具有网络结构,物质分子通过时会受到阻力,大分子物质在涌动时受到的阻力大,因此在凝胶电泳中,带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量,而且还取决于分子大小,这就大大提高了分辨能力。在琼脂糖凝胶电泳缓冲液又几种适用于天然双链DNA的电泳。琼脂糖凝胶电泳缓冲液配置常见琼脂糖凝胶电泳缓冲液配制(如图)TBE通常作为5×或10×的贮存液配制和贮存。这种浓的贮存液pH应为8.3左右,它在应用前稀释,并用同一种贮存液制备凝胶溶液和琼脂糖凝胶电泳缓冲液。上述三种电泳缓冲液都比较好...
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2016-54
聚丙烯酰胺凝胶电泳简称为PAGE(Polyacrylamide?gel?electrophoresis)聚丙烯酰氨凝胶电泳,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术。聚丙烯酰胺凝胶由单体丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合而成,聚合过程由自由基催化完成。聚丙烯酰胺凝胶电泳作用:用于分离蛋白质和寡核苷酸。聚丙烯酰胺凝胶电泳原理:常用的催化聚合方法有两种:化学聚合和光聚合。化学聚合通常是加入催化剂过硫酸铵(AP)以及加速剂四甲基乙二胺(TEMED),四甲基乙二胺催化过硫酸铵产生自...
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2016-54
MRS培养基常用于食品中乳酸菌总数测定,自然pH通常是6.2—6.4,在做乳酸菌分离的时候直接使用自然pH就可以了,如果是做纯培养,希望得到交好的菌落,或者是做液体培养,希望得到较多菌体的话,就把pH跳到6.7左右为佳。MRS培养基的原理蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉提供氮源、维生素、生长因子;葡萄糖为可发酵糖类;磷酸氢二钾为酸碱缓冲剂;柠檬酸氢二铵、硫酸镁、硫酸锰、吐温-80和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子,其成分还能抑制某些杂菌;琼脂是培养基的凝固剂。MRS培养基的配制蛋...
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2016-54
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