2016-425
2016-425
染色液是实验室中常用的试剂之一,分为天然染液和人工染料,也分碱性染料和酸性染料,以下来详细介绍一下实验室常见染色液的配制。⒈碘-碘化钾(I2-KI)溶液能将淀粉染成蓝紫色,蛋白质染成黄色,也是植物组织化学测定的重要试剂。配方:碘化钾2g;蒸馏水300ml;碘1g先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,待全溶解后再加碘,振荡溶解后稀释300mL,保存在棕色玻璃瓶内。用时可将其稀释2-10倍,这样染色不致过深,效果更佳。⒉苏丹Ⅲ(sudanⅢ或Ⅳ)能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树...
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2016-422
免疫染色实验方法和步骤免疫染色(immunolstaining)包括免疫荧光(immunolfluorescence)、免疫组化(immunolhistochemistry)、免疫细胞化学(immunolcytochemistry)等,可以参考如下步骤进行操作。1.样品准备(Samplepreparation)对于贴壁细胞:可以直接用多孔板,例如6孔板、24孔板等,培养细胞,然后到预定时间时进行固定等后续操作。也可以用洁净的盖玻片,70%乙醇中浸泡后,用无菌的镊子放置到6孔板...
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2016-422
DAPI染DNA的原理及使用方法DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole),分子式为C16H15N5·2C3H6O3,分子量457.48。DAPI是一种能够与DNA强力结合的荧光染料。它结合到双链DNA小沟的AT碱基对处,一个DAPI分子可以占据三个碱基对的位置。结合到双链DNA上DAPI分子的荧光强度提高大约20倍,常用与荧光显微镜观测,根据荧光的强度可以确定DNA的量。另外,因为DAPI可以透过完整的细胞膜,它可...
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2016-422
自1861年发明透析方法今已有一百多年。透析已成为生物化学实验室简便常用的分离纯化技术之一。在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内。下面分别介绍透析袋和透析膜使用方法和步骤透析袋使用前处理方法:1.把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。2.在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和10mmol...
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2016-422
透析是一个简单的扩散过程,溶质中小分子物质从高浓度溶液通过半透性膜扩散到低浓度溶液中,直渗透压达到平衡。由于多孔膜的选择性,使得溶质中小分子物质可以通过,而较大物质则被截留,从而分离出不同大小分子量的物质,依据分子量大小截留,可用于分离工艺,改变或控制透析的条件,可在多种透析应用中得到预期效果,通过截留分子量(MWCO)可使目标分子得到分离。所以透析袋分子量的选择就决定了实验的成败。这篇文章就详细介绍了如何选择合适的透析袋。透析膜的材质透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的多的还...
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2016-421
姬姆萨染液又称吉姆萨染色液,姬姆萨染原液,为天青色素、伊红、次甲蓝的混合物。常用作对血液涂抹标本、血球、疟原虫、立克次体以及骨髓细胞、脊髓细胞等标本进行染色的染色方法。姬姆萨染色液的配制方法很简单,但是现在很多实验室都开始买现成的姬姆萨染液,这样节省了时间,染色液的价格也不贵。姬姆萨染液配制方法:甲液:取瑞氏染粉1克,姬姆萨染粉0.3g,置于干燥清洁研钵中,另备甲醇(不含水或丙酮)500ml分数次加少量甲醇研磨,分次收集于棕色玻璃瓶中,每天早晚各摇3分钟,经1星期后即可使用。...
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2016-421
瑞氏-姬姆萨染色液是利用Romanowsky??Stain?技术原理改良而成的。主要应用于血液和骨髓涂片染色。姬姆萨染色液对胞浆着色力较强,能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,着色清晰,色泽纯正,但是对胞核着色偏深,核结构显示较差。瑞氏-姬姆萨染色液原理瑞氏-姬姆萨染色液主要应用于血液和骨髓涂片染色,它是利用Romanowsky??Stain?技术原理改良而成的。细胞的着色过程是染料透入被染物并存留其内部的一种过程,此过程既有物理吸附作用,又有化学亲和作用。各种细胞及细胞的各种成分...
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