MS培养基与微生物培养基的区别有哪些

MS培养基是其特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的离子平衡溶液，它的硝酸盐含量高，其养分的数量和比例合适，能满足植物细胞的营养和生理需要，因而适用范围比较广，多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基，也是目前使用普遍的植物组织培养基。MS培养基具有较高的无机盐浓度，能够保证组织生长所需的矿质营养还能加速愈伤组织的生长。由于配方中的离子浓度高，在配制、贮存和消毒等过程中，即使有些成分略有出入，也不会影响离子间的平衡。由于植物的多样性和生长环境MS培养基的配制植物组织...

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RNA酶的用途及破碎细胞和灭活RNA酶同步进行的方法

RNA酶又名核糖核酸酶，为白色冻干粉末，可以杀灭许多肿瘤细胞系，可以抑制导致艾滋病的HIV-1病毒在细胞中的复制，可以治疗乙肝。RNA酶用途说明：生化研究，测定核酸的结构RNase保护检测去除非特异结合的RNA分析RNA序列水解蛋白样品中的RNA纯化DNA此外，它具有显著的细胞毒性，可以杀灭许多肿瘤细胞系，可以抑制导致艾滋病的HIV-1病毒在细胞中的复制，可以治疗乙肝。破碎细胞和灭活RNA酶同步进行的方法用强烈变性如盐酸胍或硫氰酸胍溶液能迅速溶解蛋白质，导致细胞结构破碎，核蛋...

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常见的RNA酶抑制剂

RNA酶抑制剂具有广谱的RNA酶抑制作用，包括中性的真核生物的RNA的抑制作用。?分子量是50kDa的蛋白质通过非共价键与RNA酶以1：1的比例结合发挥它的抑制作用。RNA酶抑制剂与RNA酶结合的有效浓度时10-14M。而且，RNA酶抑制剂的动力学结合是非常迅速的，确保与RNA酶的迅速络合，并对其产生迅速的抑制作用。常见的RNA酶抑制剂1、焦碳酸二乙酯（DEPC）：是一种强烈但不*的RNA酶抑制剂，他通过和RNA酶的活性基因团组氨酸的咪唑环结合使蛋白质变性，从而抑制酶的活性。...

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如何避免RNA酶的污染

RNA的化学性质比DNA活跃得多。RNA分子上紧邻磷酸二脂键的2′羟基基团能直接被RNA酶利用来作为活性因子，从而使得RNA酶无需金属离子就能发挥活性。由于RNA酶在环境中广泛存在，特别是RNaseA，结构极其稳定，不能通过高温高压灭菌失活，因而极难消除，对保持RNA样品的完整性构成极大的威胁。由于RNaseA类酶依赖于活性位点处的组氨酸残基起催化作用，因此能被组氨酸烷化剂DEPC所抑制。避免RNA酶的污染的方法：1．塑料制品：尽可能使用无菌、一次性塑料制品。已标明RNase...

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福林酚法测蛋白含量步骤

福林酚法测蛋白含量早是由Lowry确定的测定蛋白质浓度的基本方法。以后在生物化学领域得到广泛的应用。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即Folin—酚试剂，以增加显色量，从而提高了检测蛋白质的灵敏度。福林酚法测蛋白含量原理：蛋白质与福林酚试剂反应,生成深蓝色复合物.蓝色的深浅与蛋白质含量成正比.可用分光光度计于500nm波长下进行测定.与标准曲线对照,而确定蛋白质含量.福林酚法测蛋白含量所需试剂Folin—酚试剂：1.试剂甲1)4%碳酸钠溶液2)0.2...

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IPTG诱导蛋白表达步骤说明

异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）是一种作用*的诱导剂，不被细菌代谢而十分稳定，因此被实验室广泛应用。当有乳糖存在时，lac操纵子（元）即可被诱导。在这个操纵子（元）体系中，真正的诱导剂并非乳糖本身。乳糖进入细胞，经b－半乳糖苷酶催化，转变为半乳糖。后者作为一种诱导剂分子结合阻遏蛋白，使蛋白构象变化，导致阻遏蛋白与O序列解离、发生转录。材料1、诱导表达材料(1)LB（Luria—Bertani）)培养基酵母膏(Yeastextract)5g蛋白胨(Peptone)10gNaCl1...

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IPTG诱导原理

异丙基-β-D-硫代半乳糖苷,英文名称IPTG。为安慰性诱导物，X-gal为生色底物，二者共同用于蓝白斑筛选。IPTG可诱导载体lac操纵子DNA区段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段，该片段可与宿主细胞编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内互补(α互补)。IPTG诱导原理先E.coli的乳糖操纵子（元）含Z、Y及A三个结构基因，分别编码半乳糖苷酶、透酶和乙酰基转移酶，此外还有一个操纵序列O、一个启动序列P及一个调节?基因I。I基因编码一种阻遏蛋白，后者与O序列结合，使操纵子（元）受...

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关于CCK8实验步骤的叙述

CCK-8为细胞增殖检测试剂盒，细胞增殖是生物体的重要生命特征，细胞以分裂的方式进行增殖。必须强调指出，通过细胞分裂，可以将复制的遗传物质，平均地分配到两个子细胞中去。可见，细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。CCK8实验步骤如下。CCK-8实验步骤1、在96孔板中配置100μl的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时（37℃，5%CO2）。2、向培养板加入10μl不同浓度的待测物质。3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间（例如：6、12、24或48小时）。4、向...

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