2016-421
嘌呤霉素(puromycin;PM)是一种蛋白质合成抑制剂,它具有与tRNA分子末端类似的结构,能够同氨基酸结合,代替氨酰化的tRNA同核糖体的A位点结合,并掺入到生长的肽链中。用嘌呤霉素筛选细胞方法如下:嘌呤霉素筛选细胞转染(24孔板进行)或电转后培养24小时,按10%密度传代(传36mm平皿),继续培养24小时,待细胞密度增20%-25%回合时;去掉培养液,PBS洗一次,加入按照佳嘌呤霉素筛选细胞的浓度(杀伤曲线试验确定)配制好的嘌呤霉素筛选细胞培养基2-3ml。根据培养...
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2016-421
嘌呤霉素(puromycin;PM)是一种抗生素,广泛用作蛋白质合成的抑制剂。其结构与氨酰tRNA3′端上的AMP结构相似,肽酰转移酶能促使氨基酸与嘌呤霉素结合形成肽酰嘌呤霉素,从核糖体上脱落,从而使蛋白质合成反应中断。嘌呤霉素的作用如下:嘌呤霉素的作用:嘌呤霉素(Puromycin)是由白黑链霉菌(Streptomycesalboniger)发酵代谢产生的一种氨基糖苷类抗生素,嘌呤霉素Puromycin通过抑制蛋白质合成而杀死革兰氏阳性菌,各种动物和昆虫细胞。嘌呤霉素Pur...
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2016-420
Bradford法测蛋白浓度是利用蛋白质-染料结合的原理,定量地测定微量蛋白质浓度的快速灵敏的方法。Bradford法测蛋白浓度原理考马斯亮蓝(CBB)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝在游离状态下呈红色,大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质—色素结合物在595nm波长下有大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝结合在2min左右的时间内达到平衡,完成反应十分迅速;其结合物在室温下1h内保持稳定。该...
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2016-420
Bradford法又称考马斯亮蓝法,是Bradford于1976年建立起来的一种蛋白质浓度的测定方法。bradford法定量蛋白质的原理是马斯亮蓝(CBB)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝在游离状态下呈红色,大光吸收在488nm;以下是bradford法定量蛋白质的原理及含量测定流程bradford法定量蛋白质的原理考马斯亮蓝(CBB)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝在游离状态下呈红色,大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质—色素...
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2016-419
血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。胎牛血清是血清中的一种,是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清。胎牛血清是品质高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分少。胎牛血清的主要作用1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂...
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2016-419
TBS缓冲液是Tris-HCl缓冲盐溶液,为等渗盐溶液加Tris-HCl缓冲液。属于常规pH缓冲液,常用于清洗免疫染色的组织或Western?Blot?中的蛋白印迹膜等,是常用分子生物学试剂。TBS缓冲液(0.05mol/L,pH7.4)主要由Tris、氯化钠、BSA、防腐剂等组成,可用于免疫金银染色中清洗组织,亦可作为封闭液的基础试剂。Tris缓冲盐水(TBS):10mmol/L,Tris含0.9%NaCl,用1NHC1调pH7.4;操作步骤(仅供参考):1、石蜡切片脱蜡水...
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2016-419
2016-418
果胶酶是一种天然的复合多糖类高分子化学物,通常包括原果胶酶、果胶甲酯水解酶、果胶酸酶,通过它们的联合作用使果胶质得以*分解。由黑曲霉经发酵精制而成,适用于果汁榨取、浓缩过滤、果汁澄清、膜组织分离。在食品、医药和日用化学行业具有广泛的用途。果胶酶的作用果胶酶由黑曲霉经发酵精制而得。外观呈浅黄色粉末状。果胶酶主要用于果蔬汁饮料及果酒的榨汁及澄清,对分解果胶具有良好的作用。天然的果胶质在原果胶酶作用下,转化成水可溶性的果胶;果胶被果胶甲酯水解酶催化去掉甲酯基团,生成果胶酸;果胶酸经...
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