透析袋原理介绍及使用方法步骤

自1861年发明透析方法今已有一百多年。透析已成为生物化学实验室简便常用的分离纯化技术之一。在生物大分子的制备过程中，除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。通常是将半透膜制成袋状，将生物大分子样品溶液置入袋内，将此透析袋浸入水或缓冲液中，样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内。下面分别介绍透析袋和透析膜使用方法和步骤透析袋使用前处理方法：1.把透析袋剪成适当长度（10-20cm）的小段。2.在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和10mmol...

查看更多

透析袋分子量的选择 如何选择合适的透析袋

透析是一个简单的扩散过程，溶质中小分子物质从高浓度溶液通过半透性膜扩散到低浓度溶液中，直渗透压达到平衡。由于多孔膜的选择性，使得溶质中小分子物质可以通过，而较大物质则被截留，从而分离出不同大小分子量的物质，依据分子量大小截留，可用于分离工艺，改变或控制透析的条件，可在多种透析应用中得到预期效果，通过截留分子量（MWCO）可使目标分子得到分离。所以透析袋分子量的选择就决定了实验的成败。这篇文章就详细介绍了如何选择合适的透析袋。透析膜的材质透析膜可用动物膜和玻璃纸等，但用的多的还...

查看更多

姬姆萨染液配制方法及原理

姬姆萨染液又称吉姆萨染色液，姬姆萨染原液，为天青色素、伊红、次甲蓝的混合物。常用作对血液涂抹标本、血球、疟原虫、立克次体以及骨髓细胞、脊髓细胞等标本进行染色的染色方法。姬姆萨染色液的配制方法很简单，但是现在很多实验室都开始买现成的姬姆萨染液，这样节省了时间，染色液的价格也不贵。姬姆萨染液配制方法：甲液：取瑞氏染粉1克,姬姆萨染粉0.3g,置于干燥清洁研钵中，另备甲醇（不含水或丙酮）500ml分数次加少量甲醇研磨，分次收集于棕色玻璃瓶中，每天早晚各摇3分钟，经1星期后即可使用。...

查看更多

简述瑞士-姬姆萨染色液的步骤

瑞氏-姬姆萨染色液是利用Romanowsky??Stain?技术原理改良而成的。主要应用于血液和骨髓涂片染色。姬姆萨染色液对胞浆着色力较强，能较好的显示胞浆的嗜碱性程度，着色清晰，色泽纯正，但是对胞核着色偏深,核结构显示较差。瑞氏-姬姆萨染色液原理瑞氏-姬姆萨染色液主要应用于血液和骨髓涂片染色，它是利用Romanowsky??Stain?技术原理改良而成的。细胞的着色过程是染料透入被染物并存留其内部的一种过程，此过程既有物理吸附作用，又有化学亲和作用。各种细胞及细胞的各种成分...

查看更多

嘌呤霉素筛选细胞的原理

嘌呤霉素(puromycin;PM)是一种蛋白质合成抑制剂,它具有与tRNA分子末端类似的结构，能够同氨基酸结合，代替氨酰化的tRNA同核糖体的A位点结合，并掺入到生长的肽链中。用嘌呤霉素筛选细胞方法如下：嘌呤霉素筛选细胞转染（24孔板进行）或电转后培养24小时，按10%密度传代（传36mm平皿），继续培养24小时，待细胞密度增20%-25%回合时；去掉培养液，PBS洗一次，加入按照佳嘌呤霉素筛选细胞的浓度（杀伤曲线试验确定）配制好的嘌呤霉素筛选细胞培养基2-3ml。根据培养...

查看更多

嘌呤霉素的作用有哪些

嘌呤霉素(puromycin;PM)是一种抗生素，广泛用作蛋白质合成的抑制剂。其结构与氨酰tRNA3′端上的AMP结构相似，肽酰转移酶能促使氨基酸与嘌呤霉素结合形成肽酰嘌呤霉素，从核糖体上脱落，从而使蛋白质合成反应中断。嘌呤霉素的作用如下：嘌呤霉素的作用：嘌呤霉素（Puromycin）是由白黑链霉菌（Streptomycesalboniger）发酵代谢产生的一种氨基糖苷类抗生素，嘌呤霉素Puromycin通过抑制蛋白质合成而杀死革兰氏阳性菌，各种动物和昆虫细胞。嘌呤霉素Pur...

查看更多

简述bradford法测蛋白浓度实验过程

Bradford法测蛋白浓度是利用蛋白质-染料结合的原理，定量地测定微量蛋白质浓度的快速灵敏的方法。Bradford法测蛋白浓度原理考马斯亮蓝(CBB)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝在游离状态下呈红色，大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质—色素结合物在595nm波长下有大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝结合在2min左右的时间内达到平衡，完成反应十分迅速;其结合物在室温下1h内保持稳定。该...

查看更多

bradford法定量蛋白质的实验原理

Bradford法又称考马斯亮蓝法，是Bradford于1976年建立起来的一种蛋白质浓度的测定方法。bradford法定量蛋白质的原理是马斯亮蓝（CBB）测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝在游离状态下呈红色，大光吸收在488nm；以下是bradford法定量蛋白质的原理及含量测定流程bradford法定量蛋白质的原理考马斯亮蓝（CBB）测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝在游离状态下呈红色，大光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质—色素...

查看更多