玻璃纸透析培养观察法

玻璃纸透析培养观察法

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⑴ 玻璃纸的选择与处理：要选择能够允许营养物质透过的玻璃纸。也可收集商品包装用的玻璃纸，加水煮沸，然后用冷水冲洗。经此处理后的玻璃纸若变硬，必定是不可用的，只有那些软的可用。将那些可用的玻璃纸剪成适当大小，用水浸湿后，夹于旧报纸中，然后一起放入平皿内121℃灭菌30min备用。
⑵ 菌种的培养：按无菌操作法，倒平板，冷凝后用灭菌的镊子夹取无菌玻璃纸贴附于平板上，再用接种环沾取少许霉菌孢子，在玻璃纸上方轻轻抖落于纸上。然后将平板置28～30℃下培养3～5天，曲霉和青霉即可在玻璃纸上长出单个菌落（根霉的气生性强，形成的菌落铺满整个平板）。
⑶ 制片与观察：剪取用玻璃纸透析法培养3～4d 后长有菌丝和孢子的玻璃纸一小块，先放在50%乙醇中浸一下，洗掉脱落下来的孢子，并赶走菌体上的气泡，然后正面向上贴附于干净载玻片上，滴加1～2滴乳酸石炭酸棉蓝液，小心地盖上盖玻片，注意不要产生气泡，不要移动盖玻片，以免搞乱菌丝。
标本片制好后，先用低倍镜观察，必要时再换高倍镜。注意观察菌丝有无隔膜，有无假根、足细胞等特殊形态的菌丝。注意其无性繁殖器官的形状和构造，孢子着生的方式和孢子的形态、大小等。