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Lowry法蛋白浓度测定试剂盒(1000T)

发布日期: 2019-08-20
浏览人气: 969

Lowry法蛋白浓度测定试剂盒(1000T)  

品牌:Solarbio | 货号:PC0030

文名称

Lowry Protein Assay Kit

储存条件

BSA附件-20℃,其它试剂RT,有效期1年

单位

 

 

保存:BSA 蛋白标准品 4℃保存有效期少 3 个月,-20℃保存有效期少一年,其他试剂室温保存 有效期少一年。试剂开封使用后请及时密闭保存,Folin 酚乙试剂颜色变成深绿色即失效。 

 

产品组成:

 

 

产品说明: Folin-酚试剂法包括两步反应:步是在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物; 第二步是此络合物将 Folin 试剂还原,产生深蓝色,颜色深浅与蛋白质含量成正比。定量范围为 5~ 500μg/ml 蛋白质。Folin 试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起,因此样品中若含有酚类、 柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用。此外,不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度稍 有不同。 

 

操作说明: 

1.根据需要量,取适量 Folin 酚甲试剂 A 和 B 按 50:1 混合,混合后有效期为 24 小时,过期失效。 

2.根据需要量,取适量 BSA 标准品用 PBS 稀释稀释 10 倍浓度 0.5mg/ml。 若采用酶标仪法(96 孔) 

3.将标准品按 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20ul 加到 96 孔板中,加 PBS 补足到 20ul。 

4.将样品作适当稀释(多做几个梯度),加 20ul 到 96 孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时 的误差,标准线前面的点误差比较大,所以尽可能的让样品点落在标准线 1/2 后。 

5.将配好的 Folin 酚甲试剂每孔加入 200ul,轻轻震动,混匀,室温放置 10 分钟。 

6.各孔加入 20 微升 Folin 酚乙试剂,迅速混匀,37℃放置 30 分钟。用酶标仪测定 A650 计算蛋白 浓度。 

 

若采用分光光度计法(接上述步骤 2) 

3.取八支(或者更多)5ml 离心管,标号,按下表加入试剂。 

4.混匀,37℃放置 30 分钟。分光光度计测定 A650 计算蛋白浓度

 

 

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