品牌:Solarbio | 货号:PC0030
英文名称 | Lowry Protein Assay Kit |
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储存条件 | BSA附件-20℃,其它试剂RT,有效期1年 |
单位 | 盒 |
保存:BSA 蛋白标准品 4℃保存有效期少 3 个月,-20℃保存有效期少一年,其他试剂室温保存 有效期少一年。试剂开封使用后请及时密闭保存,Folin 酚乙试剂颜色变成深绿色即失效。
产品组成:
产品说明: Folin-酚试剂法包括两步反应:步是在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物; 第二步是此络合物将 Folin 试剂还原,产生深蓝色,颜色深浅与蛋白质含量成正比。定量范围为 5~ 500μg/ml 蛋白质。Folin 试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起,因此样品中若含有酚类、 柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用。此外,不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度稍 有不同。
操作说明:
1.根据需要量,取适量 Folin 酚甲试剂 A 和 B 按 50:1 混合,混合后有效期为 24 小时,过期失效。
2.根据需要量,取适量 BSA 标准品用 PBS 稀释稀释 10 倍浓度 0.5mg/ml。 若采用酶标仪法(96 孔)
3.将标准品按 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20ul 加到 96 孔板中,加 PBS 补足到 20ul。
4.将样品作适当稀释(多做几个梯度),加 20ul 到 96 孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时 的误差,标准线前面的点误差比较大,所以尽可能的让样品点落在标准线 1/2 后。
5.将配好的 Folin 酚甲试剂每孔加入 200ul,轻轻震动,混匀,室温放置 10 分钟。
6.各孔加入 20 微升 Folin 酚乙试剂,迅速混匀,37℃放置 30 分钟。用酶标仪测定 A650 计算蛋白 浓度。
若采用分光光度计法(接上述步骤 2)
3.取八支(或者更多)5ml 离心管,标号,按下表加入试剂。
4.混匀,37℃放置 30 分钟。分光光度计测定 A650 计算蛋白浓度
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