抗体洗脱液的原理介绍

抗体洗脱液的原理介绍

    日益增长的抗体使用，研究目的蛋白种类一日千里，那么膜的再使用能够节约研究时间，推进研究进程，在不影响实验准确的前提下，那么在使用的意义是很明显的。现在这里我来讲一下抗体洗脱液--stripping buffer。

    在介绍抗体洗脱液的原理前，先来看看抗原抗体结合的一些环境条件吧，通常我们的抗体稀释液选择是：TBST和PBST，这里的两种抗体稀释液的pH值均在7.4-7.8之间。那么问题就来了，为什么抗体稀释液的pH值是这样的呢？

    抗原抗体的结合反应：抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原决定簇(表位)与抗体超变区的沟槽分子表面的结构互性与亲合性而结合的。

一、抗原抗体的结合力

抗原抗体间结合为非共价键结合：静电引力、范登华引力、氢键结合力、疏水作用力

二、抗原抗体的亲合性和亲合力

亲合性是指抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原表位之间相互适 应而存在的引力，由于抗原抗体的结合 反应是可逆的，若抗体的亲合力高，与抗原分子结合牢固，不易解离；反 之即容易解离。

三、亲水胶体转化为疏水胶体

大多数抗原为蛋白质，抗体是球蛋白，它们溶解在水中皆为胶 体溶液，不会发生自然沉淀。当抗原抗体结合后，蛋白质由亲水胶体转化为疏水胶体。再加入电解质，如 NaCl，则进一步使疏水胶体物相互靠拢，形成可见的抗原抗体复合物。

那么我们破坏这些中作用力，就能是抗原抗体复合物解离。

    抗体洗脱液的原理就是利用强酸环境下，破坏结合力等因素，使得抗原抗体复合物变成抗原抗体单体。说道这里，我想大家了解了stripping buffer的作用原理了吧！