Bradford蛋白浓度测定试剂盒使用说明

保存条件： G250染色液4℃保存，蛋白标准-20℃保存，本试剂盒自订购之日起九个月内有效。

Bradford蛋白浓度测定试剂盒特点：

1.Bradford蛋白浓度测定试剂盒是根据目前世界上常用的两种蛋白浓度检测方法之一Bradford 法研制而成，实现了蛋白浓度测定的快速，稳定和高灵敏度。
2.检测速度极快，10-20个样品只需不足10分钟即可完成。 
3. 灵敏度高，检测浓度下限达到25微克/毫升，小检测蛋白量达到0.5微克，待测样品体积为1-20微升。  在50-1000微克/毫升浓度范围内有较好的线性关系。
4.不象一些其它蛋白浓度测定方法（包括Lowry法），Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中巯基乙醇的浓度可高达1M，二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的去垢剂影响。需确保SDS低于0.1%，Triton X-100 低于0.1%，Tween 20, 60, 80低于0.06%。含去垢剂的样品推荐使用碧云天的BCA蛋白浓度测定试剂盒。
5.Bradford蛋白浓度测定试剂盒对样品中各种物质详细的兼容性表，参见Bradford蛋白浓度测定兼容性表。
Ø 每个试剂盒可以检测1000个样品。

Bradford蛋白浓度测定试剂盒使用说明：
1. *溶解蛋白标准品，取10ml稀释100ml ，使终浓度为0.5mg/ml。蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。
但是为了简便起见，也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。
2. 将标准品按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20微升分别加到96孔板中，加标准品稀释液补足到20微升。
3. 加适当体积样品到96孔板的样品孔中，加标准品稀释液到20微升。
4. 各孔加入200微升G250染色液，室温放置3-5分钟。
5. 用酶标仪测定A595，或560-610nm之间的其它波长的吸光度。
6. 根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。

Bradford蛋白浓度测定试剂盒注意事项： 
1. G250染色液使用前请颠倒3-5次，混匀。
2.蛋白标准请在全部溶解后先混匀，再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。
3.由于 Bradford方法本身的局限性，得到的标准曲线只是在一定范围内可以近似看成直线，要得到更为的蛋白浓度结果，可以参照实际测得的标准曲线大致计算出较为的蛋白浓度。
4.将G250染色液回复到室温再使用，有利于提高检测的灵敏度。
5.需可检测560-610nm之间波长的酶标仪一台，佳检测波长为595nm。并需96孔板。如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定，但是测定蛋白浓度时，需根据测定吸光度的杯子的体积，按比例调整G250 染色液和样品的体积。使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。