草酸铵结晶紫染色液是革兰氏染色法中的一种成分,主要由草酸铵、结晶紫、乙醇等组成。细胞经草酸铵结晶紫染色后再经Gram碘液处理,形成不溶性复合物,该复合物不能通过细胞壁,不易被脱色,所以保持紫色。
草酸铵结晶紫染色液使用说明:
1、样品处理:
①对于石蜡切片:二甲苯中脱蜡5-10分钟。换用新鲜的二甲苯,再脱蜡5-10分钟。无水乙醇5分钟。90%乙醇2分钟。70%乙醇2分钟。蒸馏水2分钟。
②对于冰冻切片:蒸馏水2分钟。
③对于培养细胞:用4%多聚甲醛固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。换用新鲜的蒸馏水,再洗涤2分钟。
2、结晶紫染色:
对于上述处理好的样品:结晶紫染色液染色10分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。
用蒸馏水或自来水充分洗涤后即可进行观察和拍照。
注意事项:
1、需自备4%多聚甲醛。如果需要脱水、透明和封片处理,还需自备二甲苯,中性树胶或其它封片剂。如果样品是石蜡切片,需自备70%和90%乙醇,无水乙醇以及二甲苯。
2、样品数量较多时,可以使用染色架和染色缸,便于操作。
3、初次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。
4、草酸铵结晶紫染色液对人体有害,请注意适当防护。
5、为了操作人员的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。