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Elisa检测试剂盒的显色液A和B有什么作用?

更新时间:2021-05-07点击次数:7689
  Elisa检测试剂盒具有敏感性高、特异性强、操作简单等优点,被广泛应用于各种抗原和抗体的测定,为辅助临床诊断与生物科研起到了积的作用。
  
  Elisa检测试剂盒检测中显色液A和B有什么作用?
  
  酶联免疫诊断试剂盒的底物A就是显色剂A(含过氧化氢)为供氢体(DH2),底物B就是显色剂B(含TMB),用于显色。另外,常用的底物还有:
  
  AP的底物,常用的为对-硝基苯磷酸脂(PNP),其反应物为黄色的对硝基酚,测读波长为405nm2)GOD的底物,为葡萄糖,供氢体为对硝基蓝四氮唑,反应产物为不溶性的蓝色沉淀。
  
  什么是TMB?TMB即四甲基联苯胺是种脂溶性较强的基团,因此容易进入细胞与细胞器中的HRP反应,且由于这种高度的脂溶性,使其易形成多聚体,在HRP活性部位产生粗大的、深兰色沉淀物,这使得TMB成为组化实验中的种很好的发色团。同时反应产物的沉淀,使得HRP的活性部位更加暴露,利于酶氧化反应进行。
  
  TMB的反应产物为深蓝色,利于光镜观察,且反应产物越聚越大,常超出单个细胞器的范围(而DAB则被限制在其内),故TMB反应的检测阈较低。
  
  由于上述优点,目TMB常用于光镜及超微结构水平的HRP及HRP-WGA神经投射的研究。需要注意的是:Elisa检测试剂盒显色液中的A液和B液应在2h内新鲜配制。另外,TMB是种较强的皮肤刺激剂,并有致癌的潜在可能,故使用时应带手套及在通风条件下操作。
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