四环素类抗生素的测定方法主要包括微生物抑制法、酶联免疫法、分光光度法、毛细管电泳色谱法、薄层色谱法、高效液相色谱法、液相色谱-质谱法等。
样品经过提取和净化后,四环素类抗生素可通过薄层色谱或液相色谱进行分离,再采用分光光度、荧光或质谱检测系统进行定量测定。
微生物法是一种传统的测定四环素类化合物和其他抗生素的分析方法。微生物通常对四环素类抗生素具有固有的敏感性。操作简便,价格低廉,不需要精密仪器和复杂的样品前处理过程,因而适合大量样品的筛选。
间接酶联免疫法可用来检测牛奶中的四环素类抗生素。检测限可达5 ng/g由于该方法所采用抗体与金霉素有强烈的交叉反应活性,因此,该法虽然不是用来检测四环素类的,但对于金霉素的检测限也低达5 ng/g。