草酸铵结晶紫染色液的操作步骤已整理好，还在等什么呢？

　　草酸铵结晶紫染色液是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成深紫色的染色液。结晶紫是一种碱性染料，可以和细胞核中的DNA结合，从而产生细胞核染色。

　　

　　染色液主要由草酸铵、结晶紫、乙醇等组成。革兰阳性菌染色中，细胞经草酸铵结晶紫染色后再经Gram碘液处理，形成不溶性复合物，该复合物不能通过细胞壁，不易被脱色，所以保持紫色。

　　

　　草酸铵结晶紫染色液操作步骤(仅供参考)：

　　

　　1、涂片：取待检细菌，于载玻片中央涂成薄层或者在载玻片上滴加少许无菌水，取菌与水混合均匀，涂成薄层。

　　

　　2、干燥：涂片后在室温下自然干燥，也可在酒精灯上略加温，使之迅速干燥。

　　

　　3、固定：手持载玻片一端，标本面朝上，在酒精灯的火焰外侧快速来回移动3~5次，每次1s，温度不宜过高，防止菌体蛋白变性，放置待凉后染色。也可以用甲醇戒乙醇固定。

　　

　　4、初染：滴加结晶紫染色液染色1-2min，清水冲洗去染色液。

　　

　　5、媒染：滴加Gram碘液，并覆盖载玻片室温放置1-2min，水洗。

　　

　　6、脱色：滴加脱色液摇动，摇动10～30s，直至流下的脱色液不出现紫色为止，立即用水冲去脱色液，终止反应。

　　

　　7、复染：滴加沙黄染色液染色，30~60s，水洗。

　　

　　8、干燥。镜检：置油镜观察。

　　

　　染色结果：革兰氏阳性菌：蓝色至紫色；革兰氏阴性菌：红色。

　　

　　草酸铵结晶紫染色液的关键在于严格掌握脱色程度，脱色时间应根据经验判断。脱色过度，阳性菌可被误染为阴性菌；脱色不够，阴性菌可被误染为阳性菌。