本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠白细胞介素2（IL-2）水平。用纯化的大鼠白细胞介素2（IL-2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素2（IL-2），再与HRP标记的白细胞介素2（IL-2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素2（IL-2）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠白细胞介素2（IL-2）浓度。

试剂盒组成

1	20倍浓缩洗涤液	20ml×1瓶	7	终止液	3ml×1瓶
2	酶标试剂	3ml×1瓶	8	标准品（2000ng/L）	0.5ml×1瓶
3	酶标包被板	12孔×4条	9	标准品稀释液	1.5ml×1瓶
4	样品稀释液	3ml×1瓶	10	说明书	1份
5	显色剂A液	3ml×1瓶	11	封板膜	2张
6	显色剂B液	3ml×1/瓶	12	密封袋	1个

标本要求

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

1000ng/ml	5号标准品	150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
500ng/ml	4号标准品	150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
250ng/ml	3号标准品	150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
125ng/ml	2号标准品	150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
62.5 ng/ml	1号标准品	150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

操作程序总结：

计算

以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

注意事项

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4．请每次测定的同时做标准曲线，好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

其他相关产品：YL0134D 人PⅢNT ELISA试剂盒 Human procollagen Ⅲ N-terminal peptide,PⅢNT ELISA KIT 48人份/96人份
YL0135D 人CRP ELISA试剂盒 Human C-Reactive Protein,CRP ELISA KIT 48人份/96人份
YL0136D 人TF ELISA试剂盒 Human Tissue KXctor,IF ELISA KIT 48人份/96人份
YL0137D 人PF-4/CXCL4 ELISA试剂盒 Human Plaet KXctor 4,PF-4 ELISA KIT 48人份/96人份
YL0138D 人CTGF ELISA试剂盒 Human connective tissue growth KXctor,CTGF ELISA KIT 48人份/96人份
YL0139D 人IL-18 ELISA试剂盒 Human Interleukin 18,IL-18 ELISA KIT 48人份/96人份
YL0140D 人MIP-2 ELISA试剂盒 Human macrophage inflammatory protein 2,MIP-2 ELISA KIT 48人份/96人份
YL0141D 人MEC/CCL28 ELISA试剂盒 Human mucosae associated epithelia chemokine,MEC ELISA KIT 48人份/96人份
YL0142D 人MPIF-1/CCL23 ELISA试剂盒 Human Myeloid Progenitor Inhibitory KXctor 1,MPIF-1 ELISA KIT 48人份/96人份
YL0143D 小鼠Eotaxin 2/CCL24 ELISA试剂盒 Mouse Eotaxin 2 ELISA KIT 48人份/96人份
YL0144D 人LKX-2/CD2 ELISA试剂盒 Human lymphocyte function associated antigen 2,LKX-2 ELISA KIT 48人份/96人份
YL0145D 人TAF ELISA试剂盒 Human TATA box binding protein/TBP-associated KXctors,TAF ELISA KIT 48人份/96人份
YL0146D 人BAFF-R ELISA试剂盒 Human B cell activation KXctorr from the tumor necrosis KXctor KXmily receptor,BAFF-R ELISA KIT 48人份/96人份
YL0147D 人LR ELISA试剂盒 Human leukoregulin,LR ELISA KIT 48人份/96人份
YL0148D 人MMP-4 ELISA试剂盒 Human matrix metalloproteinase 4,MMP-4 ELISA KIT 48人份/96人份

保存条件及有效期

1．试剂盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6个月

分享到：

上一篇：猴白介素-12ratIL-12ELISA试剂盒下一篇：人5羟色胺（5-HT）试剂盒使用说明书