液相检测小助手深度解析！检测达人必看！！！

衍生化试剂盒（Derivatization Kit）是一种预先配制好的实验工具包（基于C18色谱柱研发的方法），包含特定化学试剂、HPLC中被检测物质的所需流动相、反应条件说明和操作流程，用于对待测化合物（如氨基酸、糖类、生物胺等）进行化学衍生化处理（不包含从原料中提取目标物质的提取液）。其核心目的是通过化学反应在目标物质结构上引入特定功能基团，以增强其检测灵敏度、稳定性或色谱分离性能。

工作原理

衍生化的本质是通过化学反应改变目标物质的化学结构，通常分为以下步骤：

选择衍生化试剂

根据目标物质和检测需求选择试剂（如丹磺酰氯、邻苯二甲醛）。

反应条件控制

pH调节：例如，氨基酸衍生化需在碱性条件下进行。

温度与时间：加热加速反应。

反应类型

酰化反应：引入酰基

烷基化反应：增加挥发性。

荧光标记：丹磺酰氯与伯胺反应生成荧光衍生物。

终止：通过调节pH或加入终止剂（如盐酸）停止反应。

示例

氨基酸分析：使用邻苯二甲醛（OPA）在碱性条件下与伯胺反应，生成荧光产物，便于HPLC-FLD检测。

衍生化试剂盒功能与应用

01 功能

提高检测灵敏度：通过引入荧光基团、紫外吸收基团或电化学活性基团，使原本难以检测的化合物（如无紫外吸收的糖类）可被仪器（如HPLC、GC、LC-MS）识别。

改善分离性能：增加化合物的挥发性（用于GC）或极性（用于HPLC），优化色谱分离效果（不用特定的氨基柱、糖分析柱，用C18色谱柱也能对物质进行精准定性定量）。

保护不稳定化合物：对易氧化、易水解的分子（如某些药物代谢物）进行衍生化，提高其稳定性。

标准化操作：简化实验流程，减少人为误差，适用于高通量检测。

02 应用实例

玉米中的氨基酸分析：将玉米中的氨基酸提取出来，然后将提取物通过衍生化试剂盒衍生，然后进行高效液相检测。