满满的干货（二）：质粒DNA的提取，裂解充分了吗？

什么状态下菌体质粒DNA充分释放？

如何用试剂盒提取出质量更好的质粒?

看了上一期的“满满的干货（一）"，大家对于质粒DNA的浓度分析应该会有一定程度的了解，那么下面首先给大家介绍一下，如何用试剂盒提取出质量更好的质粒。

首先，质粒提取的好坏，除了对吸附柱特异性要求以外，操作过程也非常重要，比如菌体的裂解程度，直接导致质粒DNA释放充分释放，很多人会在裂解这一步无法判断自己是否裂解充分，下面结合图片给大家简单介绍一下。

菌液量较少时，溶液趋于透明状态（非完-全透明），即停止裂解，避免裂解过度。

菌液量较大时，菌体会裂解到半透亮状态（轻微浑浊），此时可以延长下裂解时间，或者适当增加裂解液的用量，当对着灯光观察，液体内部无雾状或浑浊状沉淀出现，整体成均一性的透亮状态（非透明），即停止裂解。

以上图片为裂解充分和不充分的结果对比。

以上是展示的索莱宝产品所提取的高质量质粒电泳图例。

通过测定不同厂家试剂盒提取的质粒浓度，发现Q公司的质粒浓度最高，但经琼脂糖凝胶电泳，结果条带亮度不如Solarbio和T公司，而且A260/A280>2.0，说明有RNA污染，导致浓度偏高。因此可以说明必须将浓度和电泳结果一块对比才可以确定质粒的质量。

索莱宝质粒提取试剂盒产品列表