一文读懂助溶剂：小试剂如何发挥大作用

科研党们，在实验室里，常常会遇到一些物质难以溶解的情况，这时候助溶剂就派上用场啦！

什么是助溶剂？

难溶性药物与加入的第三种物质在溶剂中形成可溶性分子间的络合物、缔合物或复盐等，以增加药物在溶剂中的溶解度，这第三种物质称为助溶剂（Hydrotropicagent）。一般来说，助溶剂可溶于水，多为低分子化合物，与药物形成络合物后，可数倍甚至数十倍增加药物的溶解度.

助溶剂的分类

01 PEG系列

聚乙二醇是一种高分子聚合物,可用于药物缓释和固定化酶的载体、医用高分子材料表面改性等多种方面的研究。

02 环糊精系列

能与一些有机分子形成包合物，从而增加这些物质在水中的溶解度和稳定性，常用于增溶难溶性药物或生物活性成分。

03 表面活性剂系列

Tween-80/ Triton X-100：形成胶束，帮助溶解脂类、膜蛋白。注意：高浓度可能破坏细胞膜！

SDS（十二烷基硫酸钠）：强变性剂，溶解膜蛋白和疏水多肽。

04 油类

可以有效的帮助脂溶性强的化合物溶解，可作为药物分子的载体，是常用的助溶剂/增溶剂。

05 其他

缓冲溶剂用途：维持pH稳定，保护生物分子活性（如酶、DNA、蛋白质）。

常见溶剂：

PBS（磷酸盐缓冲液）：细胞清洗、免疫组化。

Tris-HCl：核酸电泳、蛋白质纯化。

HEPES：细胞培养、酶反应体系。

注意：助溶剂作用机制多样，能提高难溶物溶解度且具有选择性，不改变主成分性质，在生物领域生物相容性良好。但使用时需严格控制用量范围，依据溶质特性选择，用于生物相关实验时做好安全性评估。

针对不同对象 怎么选择实验溶剂？

1.蛋白质相关实验

（1）维持蛋白质活性：在研究蛋白质活性时，常用缓冲溶液，如磷酸缓冲液（PBS）。因其能维持稳定 pH 值，接近蛋白质的生理环境，可避免蛋白质因 pH 波动而变性。

（2）蛋白质纯化：对于蛋白质纯化实验，除了缓冲液，还可能用到含温和去污剂的溶液。如 Triton X-100，可溶解细胞膜等脂质成分，帮助释放蛋白质，同时尽量减少对蛋白质结构的破坏，利于后续的分离纯化步骤。

（3）蛋白质结晶：进行蛋白质结晶实验，为促进蛋白质有序排列形成晶体，常选用特定 pH 值和离子强度的缓冲溶液。例如，在一些蛋白质结构解析实验中，会使用含有硫酸铵、氯化钠等盐类的缓冲体系，调节溶液条件，促使蛋白质结晶。

2.核酸相关实验

（1）核酸提取：在从细胞或组织中提取核酸时，常使用酚-氯仿混合液。酚能使蛋白质变性，氯仿可促进相分离，将蛋白质沉淀到有机相和水相的界面，核酸则保留在水相，从而实现核酸与蛋白质等杂质的有效分离。

（2）核酸杂交：核酸杂交实验需要保证核酸分子准确配对杂交，常用含特定盐离子浓度的缓冲液，如 SSC 缓冲液。它能调节溶液离子强度，促进核酸分子的复性和杂交反应，确保实验顺利进行。

（3）核酸扩增（PCR）：PCR 实验对反应体系要求严格，一般使用 Tris-HCl 缓冲液作为溶剂基础。其可维持反应体系的 pH 稳定。

3.细胞相关实验

（1）细胞培养：细胞培养需要模拟体内环境，水是基础溶剂，搭配各种营养物质组成培养液。例如，常用的 DMEM 培养基，以水为溶剂，添加了氨基酸、维生素等成分，为细胞生长提供所需营养，维持细胞正常生理功能。

（2）细胞冻存：细胞冻存时，为防止细胞在低温下受损，会使用含有保护剂的溶剂。如含 10% 二甲基亚砜（DMSO）的胎牛血清，DMSO 能降低细胞内冰晶的形成，减少对细胞的损伤，帮助细胞在低温下长期保存。

（3）细胞染色：细胞染色实验中，根据不同染色剂的性质选择溶剂。如用苏木精-伊红（HE）染色时，苏木精染液常用乙醇作为溶剂，伊红染液则以水为溶剂。

4.脂质相关实验

（1）脂质提取：脂质不溶于水，提取脂质常用有机溶剂。如氯仿-甲醇混合溶剂，能有效溶解各类脂质。

（2）脂质体的制备：制备脂质体时，常用氯仿、甲醇等有机溶剂溶解脂质材料。

（3）脂肪酸分析：在脂肪酸分析实验中，正己烷是常用溶剂。它能提取样品中的脂肪酸，且在后续的气相色谱分析等过程中，不会对脂肪酸的检测产生干扰，保证分析结果的准确性。

5.动物相关实验

考虑药物性质，脂溶性药物如紫杉醇常用PEG-400 溶解；再考虑动物生理特性，小鼠对少量 DMSO 耐受性较好，兔子则较差；还需适配给药方式，口服难溶性药物可选羧甲基纤维素钠溶液，如给大鼠灌胃中药提取物，注射给药要依据不同注射类型选合适溶剂，像肌肉注射常用生理盐水。

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