制胶液制备工艺注意事项:
1.储存条件
温度与避光:需在2-8℃条件下避光保存,以防止丙烯酰胺(Acr)和N,N'-亚甲基双丙烯酰胺(Bis)分解,确保溶液稳定性。
有效期:储存有效期为1年,需定期检查溶液状态,避免使用过期试剂。
2.毒性防护
操作规范:丙烯酰胺和双丙烯酰胺具有神经毒性,操作时需穿戴实验服、一次性手套及护目镜,避免直接接触皮肤或吸入蒸气。
废弃物处理:使用后的废液需按实验室危险废物处理流程收集,不可随意倾倒。
3.制胶液配制工艺关键点
比例控制:严格按29:1比例称量,。
溶解与过滤:
使用去离子水溶解固体试剂,可置于磁力搅拌器上加速溶解。
溶解后用0.45μm滤膜过滤,去除不溶性杂质,确保溶液澄清。
分装与保存:过滤后的溶液需分装至棕色玻璃瓶中,避免反复冻融导致降解。
4.制胶液使用前检查
溶液状态:使用前需观察溶液是否澄清,若出现絮状物或沉淀,可能因储存不当导致分解,需重新配制。
pH值验证:可通过pH试纸或pH计检测溶液pH值(通常为中性),异常时需排查原因。
5.与其他试剂的兼容性
SDS-PAGE凝胶配制:该制胶液需与TEMED、10%过硫酸铵(APS)、Tris缓冲液等配合使用,需按试剂盒说明书操作。
避免交叉污染:与其他试剂接触的容器需专用,防止引入杂质影响凝胶质量。
6.安全与应急处理
泄漏处理:若溶液泄漏,需立即用吸附材料清理,并用大量水冲洗污染区域。
皮肤接触:不慎接触时,需用大量清水冲洗15分钟以上,并就医处理。
