研究背景:
小鼠骨髓间充质干细胞的目前干细胞培养难点。小鼠的骨髓基质细胞成分复杂,间充质干细胞比率低,分离培养有一定的难度。陈博士在培养过程中就遇到该问题。他曾成功饲养成人和大鼠骨髓间充质干细胞。但新近培养的小鼠间充质干细胞状态就很差。按照自己的分析:细胞培养操作没有问题,培养条件也不错,试剂来源可靠。问题应该出现在培养基配方上。陈博士以原来的骨髓间充质干细胞培养基为基础,按照导师的提点,修改了配方,但细胞不好不坏。为此他们做了两次正交,结果缺总不理想,细胞状态并不稳定。陈博士为此焦头烂额,担心下一步的实验无法进行。经朋友介绍找到上海科兴生物科技的。
解决方案:
上海科兴的干细胞技术专家了解了陈博士的情况,培养技术、取材和试剂来源等,觉得不存在大问题;问题主要的原因是培养基的成分配比。建议陈博士重新配制培养基或使用现成的*培养基。陈博士为了加快实验进度,直接选用了上海科兴小鼠骨髓间充质干细胞培养基。
选用产品:小鼠间充质干细胞培养基 (Catalog No. BW110014)
实施步骤:
1、 使用上海科兴的小鼠间充质干细胞培养基,进行原代的取材;
2、 同样时间下,上海科兴的培养基的MSC细胞状态明显优于自己配置的培养液;
3、 经过传代,细胞的状态和增殖能力都很好;
4、 成功获得了足够进行下一步实验所需的mouse MSC。
结果分析:细胞状态良好,成梭状、紧密分布,大小较均匀。目前已经传20代。对于这次走的弯路,陈博士感慨良多。要的完成课题实验,就需要转变观念,合理利用和整合现有的各个优势资源,快速达到实验目标。