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上海科兴ELISA试剂盒显色的重要性

发布日期: 2014-06-09
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上海科兴​商贸有限公司主要经营 ELISA试剂盒 、细胞、血清、抗体、生物试剂、培养基、一抗、二抗、等产品,产品国内大部分地区 ,销售额逐年稳步提高。上海易利生物科技拥有雄厚的实力、合理的价格和优良的服务,能够及时解决和满足客户的各方面的需求。今天就来介绍ELISA试剂盒显色的重要性

显色是ELISA中的后一步温育反应,此时酶催化无色的底物生成有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。在一定时间内,阴性孔可保持无色,而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。适当提高温度有助于加速显色进行。在定量测定中,加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。定性测定的显色可在室温进行,时间一般不需要严格控制,有时可根据阳性对照孔和阴性对照孔的显色情况适当缩短或延长反应时间,及时判断。

OPD底物显色一般在室外温或37℃反应20-30分钟后即不再加深,再延长反应时间,可使本底值增高。OPD底物液受光照会自行变色,显色反应应避光进行,显色反应结束时加入终止液终止反应。OPD产物用酸终止后,显色由橙黄色转向棕黄色。

TMB受光照的影响不大,可在室温中置于操作台上,边反应观察结果。但为保证实验结果的稳定性,宜在规定的适当时间阅读结果。TMB经HRP作用后,约40分钟显色达,随即逐渐减弱,2小时后即可*消退无色。TMB的终止液有多种,叠氮钠和SDS等酶抑制剂均可使反应终止。这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间(12-24小时)不褪,是目视判断的良好终止剂。此外,各类酸性终止液则会使蓝色转变成黄色,此时可用特定的波长(450nm)测读吸光值。

以上是上海科兴​的一些建议希望对老师们有所帮助。

 

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