细菌的培养和实验步骤

在基因工程实验和分子生物学实验中，细菌是*的实验材料。质粒的保存、增殖和转化；基因文库的建立等都离不开细菌。特别是常用的大肠杆菌。大肠杆菌是含有长约3000kb的环状染色体的棒状细胞。它能在仅含碳水化合物和提供氮、磷和微量元素的无机盐的培养基上快速生长。当大肠杆菌在培养基中培养时，其开始裂殖前，入一个滞后期。然后进入对数生长期，以20~30min复制一代的速度增殖。后，当培养基中的营养成分和氧耗尽或当培养基中废物的含量达到抑制细菌的快速生长的浓度时，菌体密度就达到一个比较恒定的值，这一时期叫做细菌生长的饱和期。此时菌体密度可达到1×109~2×109/mL。培养基可以是固体的培养基，也可以是液体培养基。实验室中常用的是LB培养基。

 实验试剂

1、胰蛋白胨

2、酵母提取物

3、氯化钠

4、1mol/L NaOH

5、琼脂粉

6、抗生素（氨苄青霉素、卡那霉素等）

实验设备

1、培养皿

2、带帽试管

3、涂布器

4、灭菌锅

5、无菌操作台（含酒精灯、接种环、灭菌牙签等）

6、恒温摇床

实验材料

大肠杆菌