台盼蓝染色液使用说明书

台盼蓝染色液使用说明书
货号：C0040
规格：50ml、100ml
保存：4℃保存,一年有效。
产品简介：
台盼蓝（Trypan Blue)或称台盼兰、锥虫蓝，是细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性与细胞的存活率，是组织和细胞培养中常用的死细胞鉴定染色方法之一。 正常的活细胞细胞膜结构完整，能够排斥台盼蓝，细胞不会被染成蓝色；而丧失活性或细胞膜不完整的细胞可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失，即可认为细胞已经死亡。
台盼蓝可被巨噬细胞吞噬，故可用于巨噬细胞的活体染色剂。凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。台盼蓝染色后，通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数，就可以对细胞存活率进行比较的定量。
染色时间只需 3-5 分钟，操作简单。
使用说明：
1. 收集细胞：
用胰酶和/或 EDTA 消化贴壁细胞，悬浮细胞可直接收集。收集的细胞时用 1000-2000 rpm 离心 1 分钟，弃上清，制备单细胞悬液，并做适当稀释。
2. 台盼蓝染色：
细胞悬液与 0.4%台盼蓝溶液以 9:1 比例混匀（终浓度 0.04%），染色 3 分钟 ( 染色 3 分钟时间已经足够，但染色时间可以更长一些，但不宜超过 10 分钟) 。
3. 细胞计数：
吸取少量经过染色的细胞，用血细胞计数板计数。死细胞着蓝色并膨大，无光泽；活细胞不着色并保持正常形态，有光泽。通常要比较地进行定量，每个细胞样品少数 500 个细胞。
细胞存活率（%）= 活细胞总数/（活细胞总数+死细胞总数）×100%
注意事项：
1. 染色时间不能太长，否则活细胞也会逐渐积累染料而染成颜色，使检测结果偏低；
2. 有潜在致癌危险，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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