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大鼠神经营养因子-3ELISA试剂盒

发布时间:2012/8/24点击次数:783

大鼠神经营养因子-3ELISA试剂盒

神经营养因子3(NT-3)是神经生长因子基因家族起着重要的作用,这在脊椎动物的神经系统的开发和维护的一个新成员。NT-3和受体,神经酪氨酸激酶受体3(NTRK3,也称为元TrkC),和整个胚胎发育早期表示。NT-3是一个5的神经营养因子的生长因子,塑造通过调节神经元的存活和分化的神经系统发展。NT-3可以是一种中枢神经系统源性因子介导神经嵴(NC)的细胞增殖,在体内。NT-3已被映射到人类染色体12p和小鼠染色体6。

产品代码: 2901180015,2901180045

大小:  96T,48T

范围:   15.6pg/ml-1000pg/ml
灵敏度:    <2pg/ml中心
特异性:  没有检测到交叉反应性与NT-4 <2.5%,没有检测到与任何其他细胞因子的交叉反应性。
储存:       存放在4 ℃ 的频繁使用,在-20 ℃ 很少使用。  避免多次冻融循环(随用湿冰)
有效期: 4个月,在4 ℃ 和8个月,在-20 ℃ 。
应用范围:  对于定量检测在大鼠神经营养因子-3 的血清,血浆,体液,组织裂解物或细胞培养物上清。
注意事项应用套件
1 。在使用试剂盒,旋转管到管底,并关闭所有元件。
2 。重复以及检测标准和样品测试。
3 ,不要让96孔板中干,干板将活性成分失活板。
4 。为了避免边际效应的板孵化,由于温度差(反应可能会更强的边际井),ABC和TMB的解决方案摊薄预先加热,在37 ℃ 30分钟前使用。
大鼠神经营养因子-3 ELISA试剂盒实验步骤:
 
ABC工作液和TMB彩色显影剂必须在使用前30分钟在37℃下保温。稀释样品和试剂时,必须将它们*和均匀地混合。标准曲线。用户将决定由粗略的估计中的样品稀释倍。
 
1。每孔分装0.1毫升1000pg/ml,500pg/ml,250pg/ml,125pg/ml,62.5pg/ml,31.2pg/ml,15.6pg/ml大鼠神经营养因子-3 到预涂的96孔板中的标准溶液。加入0.1ml的样品稀释缓冲液控制(零井)。每个人血清,血浆,体液,组织裂解物或细胞培养上清液适当稀释后的样品加入0.1ml的每个空的。“样品稀释指引”上面的内容,我们建议每个神经营养因子-3 标准的解决方案,每个样本一式两份测定。 
2。密封板与盖和在37℃下孵育90分钟。 
3。取下盖子,舍弃板的内容,涂抹到纸巾或其它吸水材料板。不要让我们的井*干燥,在任何时候。 
4。加入0.1ml的生物素标记的抗大鼠神经营养因子-3 抗体工作溶液导入各孔中,并 在37℃下孵育板60分钟。 
5。三次用0.01M TBS或0.01M PBS洗板,每一次让留在洗涤缓冲液井1分钟。弃去洗涤液,或其他吸水纸巾上吸干板材料。  
6。导入各孔中,并加入0.1ml的制备ABC工作液,在37℃下孵育板30分钟。 
7。将板洗涤5次,用0.01M TBS或0.01M PBS,每一次让洗涤缓冲液的孔中逗留1-2分钟。弃去洗涤液和纸巾或其它吸水材料上涂抹板。 
8。90微升制备TMB底彩色显影剂添加到每个孔中并孵育板在37℃下15分钟(深浅不一的蓝,可以看到在井的四个集中的大鼠神经营养因子-3 标准的解决方案, 其他水井没有明显的颜色)。 
9。每孔加入0.1ml的准备TMB的一站式解决方案。颜色立即变成黄色。 
10。阅读的OD在酶标仪在450nm处的吸光度,添加停止溶液后,在30分钟之内。
 
为了计算,(相对OD 450 )=(的OD 450 ) - (的OD 450 )。可以绘制成的相对OD 标准曲线。的大鼠神经营养因子-3的浓度的样品可以被内插。      
 
注:如果测量的样品进行稀释,稀释前,乘以稀释倍数的浓度插值获得的浓度。
 
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