发布时间:2013/1/5
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BCA蛋白检测试剂(二喹啉甲酸)
BCA蛋白定量试剂应用:
蛋白质:蛋白质相互作用研究
测量柱分数亲和层析后
膜蛋白的细胞提取物的百分回收率估算
的融合蛋白的高通量筛选
亮点:
色度-估计目视或测量标准的分光光度计或酶标仪(562nm)
优良的均匀性-展品较少的蛋白质,蛋白质的变化比染料结合的方法
兼容-不受大多数离子和非离子型洗涤剂的典型浓度
适度快速-更容易和4倍的速度比传统的Lowry法
高线性-对BSA的线性工作范围相当于20〜2000μg/mL
敏感-检测液5μg/ml增强协议。
如何BCA蛋白定量试剂检测蛋白质:
BCA蛋白测定相结合的公知的还原的Cu2+为Cu1+蛋白在碱性介质中的高灵敏度和选择性的二喹啉甲酸亚铜阳离子(铜1+)由比色法检测。*个步骤是在碱性环境中,以形成光的蓝色络合物与蛋白质的螯合铜。含有三个或更多个氨基酸残基的肽在该反应中,被称为双缩脲反应,生成有色络合物配合物与二价铜离子在碱性环境中,含有酒石酸钠钾。
在第二步骤中的彩色显影反应,二辛可宁酸(BCA)与减少(亚铜)的*个步骤中形成的阳离子反应。激烈的紫色色反应产物的查询结果从两个分子的BCA螯合与一个一价铜离子。的BCA/铜配合物是水溶性的,并表现出强的线性增加蛋白质浓度在562nm处的吸光度。的BCA试剂是更敏感(检测下限)的*反应比淡蓝色的颜色的约100倍。
BCA颜色形成的反应,导致由四个位的氨基酸序列的蛋白质的氨基酸残基(半胱氨酸或胱氨酸,酪氨酸和色氨酸)的强烈影响。然而,不像在考马斯亮蓝染料结合的方法中,普遍的肽骨架也有助于颜色的形成,有助于大限度地减少由蛋白质组成差异引起的变异。
产品详细说明:
物质 支持的浓度 物质 支持的浓度 NP-40 5.00% 葡萄糖(鲜) 10mM的 EMULGEN 1.00% EDTA 10mM的 HEPES 100毫 氯化钠 1.0M DTT 1mM的 氢氧化钠 0.1M 胍•盐酸 4.0M 硫酸铵 1.5M 的Triton X-100的 5.00% 醋酸钠,pH值5.5; 200mM的 辛基-β-葡糖苷 5.00% SDS 5.00% 尿素 3.0 M 的Brij-35 5.00% 蔗糖(鲜) 40% 芦布若尔 1.00% 甘氨酸,pH 2.8 100毫 CHAPS 5.00%