肿瘤标志物检测的影响因素详述

肿瘤标志物检测的影响因素和质量控制
㈠ 分析前
1. 标本的采集。血液标本的正确采集和保存是肿瘤标志物测定结果准确的重要保证。如前列腺按摩、前列腺穿刺、射精、 导尿和直肠镜检查后，血液 PSA 和PAP 值可升高；肝、肾功能异常和胆道排泄不畅、胆汁淤滞等均可造成肿瘤标志物如 CEA 、 ALP 、 GGT 、细胞因子等浓度增高；某些药物会影响肿瘤标志物的浓度，如抗雄激素治疗前列腺癌时可抑制 PSA 产生，导致PSA假阴性结果； 唾液和汗液污染标本可使SCC 升高。
由于红细胞和血小板中也存在神经元特异性烯醇化酶（ NSE ），因此，样本溶血可使血液中 NSE 浓度 增高。试管内的促凝剂，对某些项目的测定有干扰。
2. 标本的保存。血液标本采集后应及时离心，保存 於 4 ℃ 冰箱中， 24 小时内测定；如在短期内测定，则应 -20 ℃ 保存，长期保存应置-70 ℃ 冰箱 , 标本应防止反复冻融。酶类和激素类肿瘤标志物不稳定，易降解，应及时测定或低温保存。
㈡ 分析中
1. 测定方法和试剂对检测结果的影响：
从方法学来看，肿瘤标志物测定方法很多，有放射免疫测定法，酶联免疫测定法，化学发光免疫测定法等，每种测定方法有自己的精密度和重复性，但手工操作的方法重复性较差，误差比较大，操作时要特别认真；用自动化仪器进行测定，重复性好，误差小。

不同的试剂盒测定也有差异 ,其原因可能是由于使用的单克隆抗体针对抗原的位点不同所致。有时即使使用同一抗体，也可能因抗原异质性（如原发肿瘤转移后，失去了原有的抗原性而停止分泌原有的肿瘤抗原）或基质的影响而得到不同的结果。有研究报道，使用12 种不同的 CEA 试剂盒检测某一混合血清中 CEA 的浓度，结果其差异超过 100%。导致分析间误差的主要原因是没有测定的标准化，包括缺乏统一的抗原、抗原成分、校和参考方法等。因此，在工作中要尽量使用同一种方法，同一种仪器和同一厂家的试剂盒进行测定。

2. “钩状效应”对检测结果的影响： 肿瘤标志物的范围常涵盖几个数量级，“钩状效应”可将高浓度结果错误报告为低浓度。酶联免疫测定或免疫放射测定时，若待测样本中抗原浓度过高，会出现高浓度后带现象，即“钩状效应”（ hook effect），此时免疫反应被明显抑制，出现错误的低值，要消除这种干扰，只有对样本进行适当稀释后重新测定。
3. 交叉污染对检测结果的影响： 当测定很高浓度的标本时，交叉污染成为一个导致假阳性的潜在问题，所以应不时地复查有无标本被交叉污染。
4.嗜异性抗体对检测结果的影响： 大多数肿瘤标志物的测定中常使用一对鼠单克隆抗体来与肿瘤抗原反应，如果病人血清中存在嗜异性抗体（特别是人抗鼠抗体），它可能在两种鼠单克隆抗体间起“桥梁”作用，导致在无抗原的情况下，出现肿瘤标志物浓度增高的假象。避免的办法是在样本中先加入提纯的鼠 IgG，经温育后，再用 PEG 沉淀鼠 IgG 和人抗鼠 IgG复合物，然后再进行测定。嗜异性抗体可出现在曾被鼠或宠物咬过的人，以及使用过动物免疫剂（如单克隆抗体）治疗过的人。
5 肿瘤标志物检测的质量控制
⑴ 检测结果的重复性要求：常规肿瘤标志物测定的变异系数，批内 CV<5% ， 批间 CV<10% （ 期望值 ） 。
⑵ 室内质控标本的要求：室内质控应包括阴性和阳性低值和高值质控血清，要能涵盖肿瘤标志物测定的范围 。
⑶ 室内质控品要求：以血清为基质。
⑷ 室内质控图：肿瘤标志物很少有参考方法，要坚持作室内质控图，以均值为靶值，来判断试验的稳定性和重复性。
㈢ 分析后：
1 ．参考值范围， 不同标本如血液、尿液、胸、腹水等，必须有不同的参考值。不同地区、不同人群、不同方法、不同试剂和设备应建立自己的参考值范围。
2 ．病人基础 测定 值的变化， 对于结果的 分析极 有价值。故应监测病人治疗前、治疗中和治疗后各个阶段肿瘤标志物含量 的变化，好画一张肿瘤标志物含量的变化的曲线图，以便综合分析。
3 ．上升或下降 25 ％的临床意义，一般病人的结果在排除检测方法引起的误差后，上升或下降 25 ％都有临床价值。对于测定结果升高的标本必须复查，以防测定误差。
4 ．加强与临床的交流和沟通， 由于 肿瘤标志物测定其临床意义的特殊性，必须加强与临床的交流和沟通，当改变肿瘤标志物检测方法和试剂时，必须通知临床，否则会影响结果的判断。建议医师开化验单时提供简短的病人信息，如“手术后 ”“化疗 3 次后 ” 等，这对解释结果非常重要，还可帮助我们发现实验室的偶然差错。
5 ．必须知道肿瘤标志物的半寿期， 这有助解释某些肿瘤标志物，如 AFP 和 hCG 的浓度变化，对于临床判断疗效有重要意义。