尼氏染色液100ml

尼氏染色液使用说明：
1. 样品处理
   a) 对于石蜡切片：
      二甲苯中脱蜡5-10分钟，共三次。注：脱蜡不充分会导致染色不均匀。
      无水乙醇5分钟。
      90%乙醇2分钟。
      70%乙醇2分钟。
      蒸馏水2分钟。
   b) 对于冰冻切片：
      蒸馏水2分钟。
   c) 对于培养细胞：
      用4%多聚甲醛固定10分钟以上。
      蒸馏水洗涤2分钟。
      换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2分钟。
2. 尼氏(Nissl)染色
    对于上述处理好的样品：
    尼氏(Nissl)染色液染色染色3-10分钟(可以根据染色结果和要求调整时间，染色时温度提高到37-
50℃对于25-50微米等较厚的切片可以使染色更均匀）。
    蒸馏水洗涤2次(每次数秒钟即可)。
    95%乙醇约5秒。
    此时，如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙
醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。
    注：如果用于免疫组化等染色后的复染，可以参考上述步骤在其它染色完成后直接进行尼氏(Nissl)
染色。
3. 脱水、透明、封片或进行其它染色
   a) 脱水、透明、封片：
      95%乙醇脱水2分钟。
      换用新鲜的95%乙醇再脱水2分钟。
      二甲苯透明5分钟。
      换用新鲜的二甲苯，再透明5分钟。
      用中性树胶或其它封片剂封片。
      显微镜下观察，细胞呈现斑驳的蓝紫色染色。
   b) 进行其它染色：
      如果进行免疫荧光染色，或进行Hoechst等荧光染料的染色，在Nissl染色液染色后：
      70%乙醇洗涤2次，每次2分钟。
      PBS或生理盐水或TBS或TBST等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5分钟。
      然后就可以进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色了。