品牌 | SOLARBIO/索莱宝 | CAS | 详询 |
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分子式 | 详询 | 纯度 | 详询 |
分子量 | 详询 | 货号 | BC1975 |
规格 | 100T/48S | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 测定意义:木质素过氧化物酶(EC1.11.1.14)是一种含亚铁血红素的过氧化物 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,综合 |
土壤木质素过氧化物酶(S-Lip)活性检测试剂盒说明书
微量法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC1975
规格:100T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
试剂一 | 液体12 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 液体15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂三 | 液体10 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
产品说明:
木质素过氧化物酶(EC1.11.1.14)是一种含亚铁血红素的过氧化物酶,属于木质素降解酶系,在木质素生物降解、造纸工业、纺织工业、芳香化合物转化与降解及环境污染控制等方面具有较大的应用潜力。
木质素过氧化物酶氧化藜芦醇生成藜芦醛,在310nm处有特征吸收峰。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
需自备的仪器和用品:
天平、低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔UV板、移液器、水浴锅、震荡仪、研钵、甲苯(> 98%,AR)、30-50目筛、蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料"附件
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干,过30~50目筛。
二、测定步骤
紫外分光光度计/酶标仪预热30min以上,波长调至310nm,紫外分光光度计蒸馏水调零。
样本测定(在1.5mL EP管中依次加入以下试剂):
对照管 | 测定管 | |
土样(g) | 0.04 | 0.04 |
甲苯(μL) | 30 | 30 |
充分混匀,室温静置15min | ||
试剂一(μL) | - | 200 |
蒸馏水 | 200 | - |
试剂二(μL) | 120 | 120 |
试剂三(μL) | 80 | 80 |
充分混匀,30℃振荡反应3h,冰浴5min,12000g 4℃离心10min,小心取200μL上清液于微量石英比色皿中或96孔UV板中测定310nm处的吸光值,分别记为A测定、A对照,计算ΔA=A测定-A对照。 注:若上清液不澄清可将上清液全部取出,再次离心后吸取200μL上清液测定。 |
实验实例:
称取两份0.04g槐树土土样于EP管中,分别为测定管及对照管,之后按照测定步骤操作,用96孔UV板测得ΔA=A测定-A对照=1.069-0.374=0.695,按土样质量计算酶活得:
S-LiP活性(U/g 土样)=25.687×ΔA÷W=25.687×0.695÷0.04=446.312 U/g 土样。
称取两份0.04g冬青土土样于EP管中,分别为测定管及对照管,之后按照测定步骤操作,用96孔UV板测得计算ΔA=A测定-A对照=0.424-0.185=0.239,按土样质量计算酶活得:
S-LiP活性(U/g 土样)=25.687×ΔA÷W=25.687×0.239÷0.04=153.480 U/g 土样。
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