组织及血液碱性磷酸酶活性测试盒 微量法

组织及血液碱性磷酸
酶（AKP/ALP）活性检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC2145
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：
1、标准品：10 μmol/mL酚标准液，临用前蒸馏水稀释至2.5μmol/mL备用（可以吸取25μL10 μmol/mL酚标准液和75μL蒸馏水混合备用），稀释后的标准液2-8℃保存一周。
产品说明：
AKP/ALP（Alkaline Phosphatase）是一种含锌的糖蛋白酶，在碱性环境中可水解各种天然及人工合成的磷脂单酯化合物。AKP/ALP广泛分布于人体各脏器中，以肝脏为主。
在碱性环境中，AKP/ALP催化磷酸苯二钠生成游离酚；酚与4-氨基安替*林和铁*反应红色亚醌衍生物，在510nm有特征光吸收；通过测定510nm吸光度增加速率，来计算AKP活性。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件
注意事项：

1. 试剂一、试剂二和试剂三均需避光保存。

2. 试剂三变蓝绿色后不能再使用。

3. 加入试剂三后必须立即混匀，否则显色不全。

实验实例：

1. 取0.1g小鼠胰腺加入1mL提取液进行匀浆研磨，取上清后按照测定步骤操作，测得计算A测定管=0.169、A对照管=0.047、A空白管=0.049、A标准管=0.449，按样本质量计算酶活：

AKP/ALP酶活（U/g质量）=0.167×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)÷W=0.167×（0.169-0.047）÷（0.449-0.049）÷0.1=0.509 U/g 质量。

1. 取兔血清后按照测定步骤操作，测得计算A测定管=0.147、A对照管=0.047、A空白管=0.049、A标准管=0.449，按血液体积计算酶活：

AKP/ALP酶活（U/mL）=0.167×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管) =0.167×（0.147-0.047）÷（0.449-0.049）=0.0418 U/mL。
相关发表文献：

1. Yang J, Zhang K, Que K, et al. Surface modification of titanium with hydroxyapatite layer induced by phase-transited lysozyme coating[J]. Materials Science and Engineering: C, 2018, 92: 206-215.

2. Yu Jiang,Dantian Zhu,Wenfeng Liu,et al. Hedgehog pathway inhibition causes primary follicle atresia and decreases female germline stem cell proliferation capacity or stemness. Stem Cell Research & Therapy. July 2019;(IF4.627)

3. Zhongshi Xu,Feng Dai,Ji Chen,et al. Experimental research into the potential therapeutic effect of GYY4137 on Ovariectomy-induced osteoporosis. Cellular & Molecular Biology Letters. October 2018;(IF3.367)

4. Wanxiu Cao,Jing Li,Yaoxian Chin,et al. Transcriptomic analysis reveals effects of fucoxanthin on intestinal glucose transport. Journal of Functional Foods. October 2018;(IF3.197)

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