鼠尾胶原蛋白I型

鼠尾胶原蛋白I型
货号 ：C8062
保存 ：4℃保存，切勿冻存，有效期为一年。
规格 ：10mg, 5mg/ml, 溶解于 0.006mol/L HAc, 无菌。

产品简介 ：
    索莱宝鼠尾胶原蛋白 I 型(rattailtendon collagen type I)是通过 Birkedal-Hansen 的方法，通过醋酸抽提、氯化钠沉淀、磷酸氢二钠沉淀等步骤制备的。本公司鼠尾胶原蛋白可用于包被细胞培养器皿，培养一些在普通细胞培养器皿中不易贴壁的细胞。也可用于制备三维胶，模拟真实的生长环境，使细胞在三维环境中生长。
    1，在使用索莱宝鼠胶原蛋白 I 型包被的细胞培养皿中检查到 PC-12 细胞的贴壁和生长。
    2，在 1mg/ml 浓度以上，pH 为 7 左右时可形成具有一定强度的三维胶，检查到 NIH-3T3 细胞在三维胶内正常生长、PC-12 细胞在三维胶表面正常生长。

使用方法 ：
    1、细胞培养器皿的表面包被 推荐浓度： 1-5ug/cm 2
以包被浓度为 2 ug/cm 2 为例：用无菌 0.006mol/L(0.36g/L) 乙酸将胶原蛋白稀释0.012mg/ml。
    按以下表格体积加到相应的培养器皿中：
表面积（cm 2 ,每孔或每皿）  加入 0.012mg/ml 胶原的体积( ul )
96 孔细胞培养板  0.3  50
24 孔细胞培养板  1.9  300
12 孔细胞培养板  3.8  600
6 孔细胞培养板  9.5  1580
35mm 细胞培养皿  8  1330
60mm 细胞培养皿  21  3500
100mm 细胞培养皿  55  9170
    确保胶原蛋白溶液铺满器皿的表面，开盖在超净台上晾干。 也可以在室温放置 1 小时后，用 PBS 洗 3-4次后直接使用。包被好的器皿在 4-25℃少可保存 3 个月以上的时间。
 

2、三维胶原的制备
    鼠尾胶原蛋白 I 型在浓度 1mg/ml 以上， pH 7 左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度 1-2mg/ml。胶原蛋白溶解于 0.006mol/L 乙酸中，在成胶过程中需要加入 0.06×体积的 0.1mol/L NaOH 来中和。需要的溶液 （均需要无菌、 预冷） ： 10×PBS （可含 10 mg/L 的酚红用于 pH 指示） 或 10×培养液 ， , 0.1mol/LNaOH，0.1mol/L 乙酸(一般不用)，双蒸水
    A． 不含细胞的三维胶原的制备（以配制 1 毫升，1mg/ml 三维胶为例）：将 200ul 鼠尾胶原蛋白 I 型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中，加入 690ul H2O。然后加到 12ul 0.1mol/L NaOH 中（如果反过来把 12ul 0.1mol/LNaOH 加到胶原溶液中， 会由于 NaOH 不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结） ， 立即混匀。 再加入 100ul 10×PBS
或 10×培养液，混匀后立即加到培养器皿中(混匀后 pH 为 7 左右，如果 PBS 或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用 pH 试纸测试)。将培养器皿在室温(25 度左右)下放置 20 分钟待胶凝固后，转移到培养箱内。如果配制中使用的是 10×PBS，使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。
     B．含细胞的三维胶原的制备（以配制 1 毫升，1mg/ml 三维胶为例）：准备好悬浮于培养液的细胞，并放置于冰浴中。 将200ul鼠尾胶原蛋白I型 (5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中 （如果反过来把12ul 0.1mol/L NaOH加到胶原溶液中，会由于 NaOH 不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入 23ul 10×PBS 或10×培养液，混匀(混匀后 pH 为 7 左右，如果 PBS 或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用 pH 试纸测试)。加入 760ul 的细胞悬浮液，混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温下放置 20 分钟待胶凝固后，加入适当体积的细胞培养液，转移到培养箱中培养。

注意事项 ：
    鼠尾胶原蛋白 I 型在室温下 pH 中性时可迅速成胶，在操作过程中要尽量保持低温。

订购说明：

1、绝大部分产品备有现货，一般情况下都能订货当日发货。 
2、部分非常用产品，需提前1－2日预订，海外期货则需要提前3-6周预订。 
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化，若有变动以订货当日新价格为准。 
4、每日订单截止时间为16点整，部分城市可到17点整，因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
5、请办理完货款后，将收据、底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、短信、等形式通知我们。

运输说明：

1、极低温产品：极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来，再用泡沫盒密封，胶带层层粘住泡沫盒，放入索莱宝的箱子，然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
2、低温产品：低温产品运输过程中加装索莱宝冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来，再使用泡沫盒密封，用胶带严实密封泡沫盒，再放入索莱宝的箱子（保温效果少可以持续一周），然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
3、常温产品：常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货，准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中