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产品名称:

判断SDS-PAGE上多肽分子量的超低分子量蛋白maker

产品品牌: SOLARBIO/索莱宝 价格:
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2024-03-22
判断SDS-PAGE上多肽分子量的超低分子量蛋白maker
货号 : PR1300
规格 : 15T (150 µ1)
保存 : -20℃保存,有效期为一年。

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝

判断SDS-PAGE上多肽分子量的超低分子量蛋白maker
货号 : PR1300
规格 : 15T (150 µ1)
保存 : -20℃保存,有效期为一年。


产品简介: 
    本产品包含3种多肽和2种低分子量蛋白质组成, 分子量范围为3. 3kD-20. 1kD。 可以用来判断SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。本品为蛋白质和多肽混合物的冻干粉,每种蛋白含量约为15-22.5ug,配有一支1×上样缓冲液。


使用说明:
    1. 开封后,溶于150 µ1 1×上样缓冲液,于95℃水浴5分钟,可根据需要进行小量分装,每管10 µl,-20℃贮存,每次取一管使用,避免反复冻融。
    2. 使用前取分装后的小管室温融化后,95℃预热5分钟即可上样电泳, 用考马斯亮蓝G-250染色后可见5条蛋白带(见下示意图) 。


 

凝胶的配置方法: 

分离胶分离胶分离胶分离胶夹层胶浓缩胶
 20%/4.5ml16.5%/4.5ml15.5%/4.5ml10%/2ml4%/2ml
49.5%T 3%C 0.407ml0.160ml
49.5%T 6%C 1.82ml1.50ml1.395ml
凝胶缓冲液1.50ml1.50ml1.50ml0.667ml0.496ml
甘油0.48ml0.48ml0.48ml //
ddH 2 O0.70ml1.02ml1.125ml0.926ml1.344ml
10%APS 40µl40µl40µl20µ|20µ|
TEMED5µl5µl5µl3µl 3µl 


凝胶制备及染色注意事项: 
    1. 先配制分离胶,聚合后再配制夹层胶,后配制浓缩胶,3种胶的制胶体积比为4:1.5:1。电泳时,30v跑1-2小时后,待指示前沿到达分离胶上沿时,把电压调100v,电泳结束,整个电泳过程大约需要6-8小时。
    2. 由于多肽所含的氨基酸数目较少,因此如该多肽含有过多的极性氨基酸(碱性或酸性),则会影响其在SDS-PAGE 图上的条带迁移率,即其表观分子量可能和多肽的氨基酸理论推算分子量有一定距离。
    3. 由于 SDS-PAGE 的图谱上,蛋白质对数分子量和迁移率成正比直线关系的分子量范围为 15,000-200,000因此对于分子量小于 10000 的蛋白质或多肽的分子量,只能根据标准分子量进行估计,推断其是否落入预测的分子量范围。
    4. 由于超低分子量多肽(3000 及 3000 以下) ,极易从凝胶上浸出,因此染色及脱色时间不宜太长,脱色后凝胶也不宜在水中浸泡保存过久,否则条带会消失。
    5. 电泳之后可将胶置于固定液中固定20分钟,再进行染色,能得到较好的蛋白条带;如时间不允许,也可不进行固定直接染色。 如果使用配方7进行染色时效果不好或考虑其毒性, 请选择本公司的考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液(货号:P1300),该产品具有染色快,无毒,灵敏性高等特点,是常规染色液的替代品。


相关产品 :

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T1070 5×Tris- 甘氨酸电泳缓冲液
P1300-500  考马斯亮蓝快速染色


附: 小分子蛋白质SDS-PAGE 电泳试剂配制
1. 49.5% T 3 % C (配制夹层胶和浓缩胶)
丙烯酰胺 48g
甲叉双丙烯酰胺 1.5g
用ddH 2 0溶解后定容100ml
2. 49. 5 % T 6 % C (配制分离胶)
丙烯酰胺 46. 5g
甲叉双丙烯酰胺 3. 0g
用ddH 2 0溶解后定容100ml
3. 凝胶缓冲液
Tris碱 182g
ddH 2 0 300ml
用HCl调节pH值8.45
用ddH 2 0定容 500ml
再加入SDS 1.5g
4 . 10×阳极缓冲液(下槽缓冲液〕
Tris碱 121. 1 g
ddH 2 0 400ml
用HCl调pH值8.9
用ddH 2 0定容 500ml
5. 阴极缓冲液(上槽缓冲液)
Tris碱 12 .11g
Tricine 17.92g
SDS 1g
用ddH 2 0定容1000ml
此溶液不用调节pH值
6. 固定液
0.5% 戊二醛
30% 乙醇
用ddH 2 0定容100ml
7. 染色液
50% 甲醇
10% 乙酸
0.2% 考马斯亮蓝G-250
用ddH 2 0定容500ml

 

判断SDS-PAGE上多肽分子量的超低分子量蛋白maker订购说明:

1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。 
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http://www.chem17.com/st164116/product_22057159.html运输说明:

1、极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入索莱宝的箱子,然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
2、低温产品:低温产品运输过程中加装索莱宝冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来,再使用泡沫盒密封,用胶带严实密封泡沫盒,再放入索莱宝的箱子(保温效果少可以持续一周),然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
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