层析填料树脂 DEAE纤维素 DE-52

层析填料树脂 DEAE纤维素 DE-52
货号 ：C8930
规格 ：50g/100g

简介
    DEAE-纤维素，它采用平均粒径为50µm的颗粒型亲水高分子聚合物，表面又用大分子糖链接枝，使它有更高的比表面积和更好的生物兼容性，它在高流水下保持更高载量，同时又具有更好的分辨率。由于比表面积大，平衡和洗脱的时间也更短。它经过接枝即使是纯化病毒，质粒等超大分子的物质，载量基本保持不变。本产品物理和化学稳定性好，使用寿命长，操作方便。

亲和填料特性

特点 载量大，分辨率好，流速高，使用方便。
基质 高度交联纤维素
配基 二乙基氨基乙基
配基密度 40µmol /ml
吸附载量  180mg HSA/ml
填料的颗粒大小  50µm
大流速  300cm/h
pH范围  3-10，在位清洗时pH范围可到2-11

化学稳定性
    各种缓冲液及盐，0.5M NaOH及醋酸，8M脲，6M盐酸胍，乙醇，异丙醇等

物理稳定性

    0.1M中性缓冲液中，120 30min  ℃

保存温度 ：+4~30 ℃

保存干粉：1g=3-4ml

三 、 保存
    产品应密封贮存在 4℃~30℃（保存溶液为 20% 乙醇） ，通风、干燥、清洁的地方。可长期保存。

四 、 操作步骤 ：
1 、 装柱
   （1）所需要用到的材料的温度要与色谱操作的温度一样，液体好做脱气处理。填料可直接称量需要的量用缓冲液溶涨一小时装柱即可。
   （2） 在柱子下端加入 20%乙醇， 以除去柱子中的空气， 关闭柱子出口， 在柱内保留少量的 20%乙醇。 20%乙醇容易产生气泡，可以在里面加 1%吐温避免气泡产生。也可以换成纯水装柱子，但是需要把填料中的 20%乙醇也换成纯水，具体的方法取需要体积的填料在抽滤漏斗上进行，也可以小心倾去填料上的 20%乙醇，再换成 5 倍体积的纯水，反复沉淀去上清，5 次左右就可以用于装柱子。
   （3）此填料颗粒比较细，所以一定要注意柱子要选择合适的筛网，不能漏，也可以取点填料加到筛网上试试，如果没有问题再将填料连续倒入柱子时，要用玻璃棒的紧靠柱子内壁引流，以减少气泡的产生，让填料先自然沉降到填料体积不再变化，而填料和上面的液体很好分层，上层溶液*澄清，就可以开泵用适当的流速压柱子，填料体积不再变化后，再把转换头紧顶在填料上就可以平衡柱子使用。使用的流速要小于装柱子的流速。
   （4）在装柱子前，填料从冰箱中取出少要室温放置 2-3 个小时，这样避免装柱子时由于温度变化而使柱子中产生气泡。
2 、 蛋白的结合
    样品的盐浓度和 pH 要尽量和平衡柱子的缓冲液*，盐浓度过高或者 pH 带低也许挂不上，所以要根据自己的样品做适当调整。
3 、 蛋白的洗脱
   （1）样品用平衡液配制，浑浊的样品要离心和过滤后上样。盐浓度太大的样品处理后再配。
   （2）一般情况是让目标产品结合在柱子上，用平衡液洗去杂质，再选择一种洗脱液洗下目标产品。
   （3）介质对样品组分吸附的程度取决于样品的带电性质、流动相的离子强度和 pH 值。盐浓度小，介质对样品组分吸附较牢。用 DEAE 介质时，推荐的 pH 值是大于目标产品等电点 1 个单位。
4 、 再生清洗
   （1）每次用完好用 0.5MNaOH 含 2M NaCl 洗 5 个床体积，再用水洗 5 个柱床体积，然后用 20%乙醇保存， 使用 3-5 次后在水洗之后再用 70%的乙醇或 30%异丙醇都含 1%吐温洗 5 个柱床体积， 后 20%的乙醇流洗 5 个柱床体积。
   （2）有机溶剂和水混合很容易产生气泡，为了避免这样情况，可以把配好的有机溶剂在室温放置，再使用，这样可以避免气泡进柱子而导致柱子不能正常使用。

相关文献：

《Macrophage immunomodulatory activity of the cationic polymer modified PLGA nanoparticles encapsulating Alhagi honey polysaccharide》 作者:Adelijiang Wusiman,Jin He,Tianyu Zhu,Zhenguang Liu,Pengfei Gu,Yuanliang Hu,Jiaguo Liu,Deyun Wang 期刊:International Journal of Biological Macromolecules 影响因子:4.784 PMID:
《Hypoglycemic activity and gut microbiota regulation of a novel polysaccharide from Grifola frondosa in type 2 diabetic mice》 作者:Yuqing Chen，Dan Liu，Dingyi Wang，Shanshan Lai，Ruting Zhong，Yuanyuan Liu，Chengfeng Yang，Bin Liu 期刊:Food and Chemical Toxicology 影响因子:3.977 PMID:30826407

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