欢迎光临北京索莱宝科技有限公司网站!
销售咨询热线:
13720003930
您的位置: 网站首页 > 产品中心 > 细胞相关产品 > 细胞培养试剂 > CA1410细胞培养试剂 活性氧检测试剂盒
  • 细胞培养试剂 活性氧检测试剂盒
产品名称:

细胞培养试剂 活性氧检测试剂盒

产品品牌: 索莱宝 价格: 660
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2019-12-18
细胞培养试剂 活性氧检测试剂盒
货号 :CA1410
规格 :100-500T
活性氧检测试剂盒 (Reactive Oxygen Species Assay Kit) 是一种利用荧光探针 DCFH-DA 进行活性氧检测的试剂盒。DCFH-DA 本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而 DCFH 不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内。

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号CA1410
规格100T供货周期现货
主要用途一种利用荧光探针 DCFH-DA进行活性氧检测的试剂盒。应用领域医疗卫生,化工,生物产业,石油

细胞培养试剂 活性氧检测试剂盒
货号 :CA1410
规格 :100-500T


产品内容 :

A 液DCFH-DA(10 mM)0.1 ml −20 ºC 保存
B 液活性氧阳性对照(Rosup, 50mg/mL )1 ml−20 ºC 保存
 说明书 1 份 


产品简介 :
    活性氧(Reactive oxygen species, ROS) 包括超氧自由基、 过氧化氢、 及其下游产物过氧化物和羟化物(O2? ? ,H2O2, ?OH, ONOO ? , ?NO)等,参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。采用
2,7-dichlorofluorescin diacetate (DCFH-DA)是迄今常用、灵敏的细胞内活性氧检探针。DCFH-DA 没有荧光,进入细胞后被酯酶水解为 dichlorofluorescin (DCFH)。在活性氧存在时 DCFH 被氧化为不能透过细胞膜的强绿色荧光物质 dichlorofluorescein (DCF),其荧光在激发波长 502 nm,发射波长 530 nm 附近有大波峰,强度与细胞内活性氧水平成正比。此活性氧检测系统本底低,灵敏度高,重复性好,操作简便。
本试剂盒适于荧光显微镜、激光共聚焦显微镜等图像检测,荧光分光光度计、荧光酶标仪、流式细胞仪定量 ROS 检测。


作波长:
适宜激发波长 500、485 (500 ± 15 nm),适宜发射波长 525 (530 ± 20 nm)。也可按照 FITC 荧光检测条件检测。


操作步骤 :
一 、 试剂准备 :
    1. DCFH-DA 可稀释于培养基或缓冲液中。 血清或培养基颜色并不影响 DCFH-DA 及细胞内荧光产生, 但可能会影响荧光显微镜观察,干扰荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪荧光测定。可将 DCFH-DA 稀释于无酚红培养基或适宜的缓冲液如 PBS 中。这依赖于使用何种荧光设备进行测定。
    2. 加入 DCFH-DA 的时机或孵育时间,以终能顺利检测细胞内活性氧为目的。药物处理时间较短(<2小时)或预计 ROS 效应较弱,可先加或同时加入 DCFH-DA。反之,treat 刺激时间较长(>6 小时)或预计产生ROS 效应较强,可后加 DCFH-DA。
    3. 活性氧供体含高纯度 12 mM H2O2。加入细胞后其本身即是一种活性氧,而且在代谢过程中可产生其它类型的活性氧,均可使 DCFH-DA 氧化为 DCF 呈现强绿色荧光。因而,用户可使用该试剂作为测试实验系统或仪器的阳性试剂,以初步观察细胞活性氧所产生的荧光的一般特征,并且也可以将该实际作为实验的一个阳性对照。推荐该试剂的细胞工作浓度为 20~100 µM 或更低浓度,但超过 200µM 将产生细胞毒。如果用户熟悉 ROS 荧光或实验没有必要采用阳性对照,可以不加该试剂。
二 、 加入荧光探针 :
    1. 加入 DCFH-DA 于培养基,推荐初始工作浓度为 10 µM。对不同的细胞和处理,DCFH-DA 工作浓度可为 100 nM~20 µM,需进行预实验确定合适的浓度。总体稀释倍数应在 1:500~1000 以上以避免 DMSO 对细胞的影响。以 DMSO 作为溶剂对照。
    2. 37 ºC 孵育细胞 30min~几个小时,通常 30-60min 即可。孵育时间长短与细胞类型、刺激条件、DCFH-DA 浓度有关。
    3. PBS 洗涤细胞 2 次。
三 、 荧光检测
    采用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜图像检测照相,绿色荧光强度代表活性氧水平。也可进行微板荧光分析仪(multiwell fluorescence plate reader)实时或每 10 分钟分时逐点检测荧光强弱。对于流式细胞仪可将细胞用胰酶消化 PBS 洗涤后重悬检测。

相关文献:

《Gecko Active Components Regulates Endoplasmic Reticulum Stress to Induce the Apoptosis of KYSE150 Cells through PERK Pathway》 作者:Yimeng Duan, Lengxin Duan, Zeyue Huang, Bingbing Wang, Jiangang Wang 期刊:Journal of Biosciences and Life Sciences 影响因子:0.552 PMID:
《Medicinal supplement genipin induces p53 and Bax?dependent apoptosis in colon cancer cells》 作者:Jingwang Ye, Jing Li, Xiangfeng Wang, Ling Li 期刊:Oncology Letters 影响因子:1.871 PMID:30127884
《Cell death induced by α-terthienyl via reactive oxygen species-mediated mitochondrial dysfunction and oxidative stress in the midgut of Aedes aegypti larvae》 作者:Jie Zhang,Shakil Ahmad,Lan-Ying Wang,Qian Han,Jian-Chun Zhang,Yan-Ping Luo 期刊:Free Radical Biology and Medicine 影响因子:5.657 PMID:31022448
《白头翁汤正丁醇提取物诱导白念珠菌生物被膜细胞凋亡》 作者:施高翔, 汪云霞, 冯鑫, 邵菁, 汪天明 期刊:中国真菌学报 影响因子:0.576 PMID:
《Autologous decellularized extracellular matrix protects against H2O2-induced senescence and aging in adipose-derived stem cells and stimulates proliferation in vitro》 作者:Xiaofang Yu, Yucang He, Zhuojie Chen, Yao Qian, Jingping Wang, Ziwan Ji, Xiaoyan Tan, Liqun Li, Ming Lin 期刊:Bioscience  Reports 影响因子:2.535 PMID:31048361
《In vitro evaluation of the neuroprotective effect of oligo-porphyran from Porphyra yezoensis in PC12 cells》 作者:YingJuan Liu,Zhenzhen Deng,Lihua Geng,Jing Wang,Quanbin Zhang 期刊:Journal of Applied Phycology 影响因子:2.635 PMID:
 

细胞培养试剂 活性氧检测试剂盒订购说明:

1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。 
2、部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。 
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日新价格为准。 
4、每日订单截止时间为16点整,部分城市可到17点整,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
5、请办理完货款后,将收据、底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、短信、等形式通知我们。


 

留言框

  • 产品:

  • 留言内容:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 详细地址:

  • 省份:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7