品牌 | SOLARBIO/索莱宝 | 货号 | E1170 |
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规格 | 500ml | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 乙二胺四乙酸别名EDTA,白色粉末。溶于氢氧化钠、碳酸钠和氨溶液等碱性溶液中,微 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,石油 |
DNA电泳试剂 0.5M EDTA (PH8.0)
货号 :E1171
规格 :100ml/500ml
保存 :常温保存,有效期 1 年。
产品简介 :
一些组织内含有骨质或钙化灶时,含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片。这是因为钙和石蜡之间的密度不同,较难切除完整的切片。对含钙组织好固定之后,再进行脱钙或二者同时进行。然后进行下游的实验,如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。用于脱钙的试剂很多,脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及电解法脱钙。
EDTA 是一种相对较好的螯合脱钙剂,对组织结构影响小,可以较好的保存组织的某些酶类, 经 EDTA脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。但是该法脱钙速度太慢,一般脱需要数周数月。
Solarbio EDTA 脱钙液优点:①经 EDTA 脱钙的组织染色结果好;②对组织的结构损害小;③用化学方法测试可以确定脱钙的终点。
Solarbio EDTA 脱钙液缺点:①脱钙速度很慢,不适合常规标本脱钙使用;②脱钙后组织会稍微变硬。
操作步骤 :
1,骨组织脱钙时,取材不易过厚,一般大约 5mm。
2,组织固定后,用 PBS 清洗 3 次,每次 20min。
3,组织用蒸馏水洗清洗 3 次,每次 20min。
4,组织转移 20~30 倍体积的 EDTA 脱钙液中,脱钙 10~30 天或更长时间。如果想加快脱钙速度,可以置于 37℃进行脱钙。如果必要,更换新的 EDTA 脱钙液继续脱钙,多数组织脱钙 2 周~3 个月即可,每周更换一次,直终点。亦可采用微波快速脱钙法:微波炉设在 200W 左右的档位,每次加热 5min,依据组织厚度和密度重复 3~5min,中间间隔 3~5min。
5,用蒸馏水冲洗数次。
6,常规脱水、包埋。
注意事项 :
1,厚度 5mm 的骨组织块脱钙时间一般脱钙 10~30 天即可。
2,适当加温能加快脱钙的速度,一般不应超过 37~40℃,温度过高容易使骨组织造成松散解体,尤其不可大于 60℃。
3,脱钙应*,防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间,以免脱钙过长引起组织损害。
4,脱钙用具避免使用金属容器,尽量使用玻璃容器。
5,骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行,不应先脱钙后固定,以便减少组织的损伤程度。
6,每隔一段时间检测一次脱钙程度,避免脱钙过度,脱钙过度会增加组织的损伤程度,影响染色结果。
7,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
附录 :
脱钙终点的测定(物理法):采用针刺、手掐、钳夹等方法,当骨组织变软或针刺时没有阻力感即可终止
脱钙。物理检测法会对组织结构有一定的损害, 尽量避免用力过大或反复检测。
相关文献:
《Long noncoding RNA ENST00000413528 sponges microRNA‐593‐5p to modulate human glioma growth via polo‐like kinase 1》 作者:Ren Zhang,Ruo‐Lun Wei,Wei Du,Li‐Wei Zhang,Tao Du,Ya‐Dong Geng,Xin‐ting Wei 期刊:CNS Neuroscience & Therapeutics 影响因子:4.458 PMID:30924320
《Guangxi cobra venom-derived NGF promotes the osteogenic and therapeutic effects of porous BCP ceramic》 作者:Pan Jin, Fuqiang Yin, Li Huang, Li Zheng, Jinmin Zhao & Xingdong Zhang 期刊:Experimental & Molecular Medicine 影响因子:2.573 PMID:28386125
《Electrochemical gene sensor based on a glassy carbon electrode modified with hemin-functionalized reduced graphene oxide and gold nanoparticle-immobilized probe DNA》 作者:Yongkang Ye,Jiaona Gao,Hao Zhuang,Haisong Zheng,Hanju Sun,Yingwang Ye,Xuan Xu,Xiaodong Cao 期刊:Microchimica Acta 影响因子:5.705 PMID:
注意事项 :
1,厚度 5mm 的骨组织块脱钙时间一般脱钙 10~30 天即可。
2,适当加温能加快脱钙的速度,一般不应超过 37~40℃,温度过高容易使骨组织造成松散解体,尤其不可大于 60℃。
3,脱钙应*,防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间,以免脱钙过长引起组织损害。
4,脱钙用具避免使用金属容器,尽量使用玻璃容器。
5,骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行,不应先脱钙后固定,以便减少组织的损伤程度。
6,每隔一段时间检测一次脱钙程度,避免脱钙过度,脱钙过度会增加组织的损伤程度,影响染色结果。
7,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
附录 :
脱钙终点的测定(物理法):采用针刺、手掐、钳夹等方法,当骨组织变软或针刺时没有阻力感即可终止
脱钙。物理检测法会对组织结构有一定的损害, 尽量避免用力过大或反复检测。
DNA电泳试剂 0.5M EDTA (PH8.0)