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产品名称:

蛋白定量试剂Bradford蛋白浓度测定试剂盒

产品品牌: 索莱宝 价格:
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2020-04-16
蛋白定量试剂Bradford蛋白浓度测定试剂盒
货号:PC0010
规格:2500T
保存:开封使用后请密封保存,本试剂盒自订购之日起九个月内有效。

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号PC0010
规格2500微孔(100T)供货周期现货
主要用途考马斯亮兰G-250染料,在酸性溶液中与蛋白质结合,使染料的最大吸收峰的位置(I应用领域医疗卫生,化工,生物产业,石油

蛋白定量试剂Bradford蛋白浓度测定试剂盒
货号:PC0010
规格:2500T
保存:开封使用后请密封保存,本试剂盒自订购之日起九个月内有效。

 

产品内容:

组成 包装(2500 微孔)保存
5×G250 染色液100ml2-8℃
PBS 稀释液30ml 2-8℃
蛋白标准(5mg/ml BSA)1ml-20℃

 

产品简介:
    考马斯亮兰 G-250 染料,在酸性溶液中与蛋白质结合,使染料的大吸收峰的位置(Imax),由 465nm 变为 595nm,在一定的浓度范围内,测定的吸光度值 A595 与蛋白质浓度成正比。Bradford 法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响,样品中巯基乙醇的浓度可高达 1M,二硫苏糖醇的浓度可高达 5mM,但受略高浓度的去垢剂影响,需确保 SDS 的浓度低于 0.1%,Triton X-100 低于 0.1%,Tween 20, 60, 80 低于 0.06%。
    含去垢剂的样品推荐使用索莱宝生产的 BCA 蛋白浓度测定试剂盒。


操作说明:
一.微孔酶标仪法
    1.  完全溶解蛋白标准品,取 10ul,稀释 250ul ,使终浓度为 0.2mg/ml。待测蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,也可以用 0.9%NaCl 或 PBS 稀释标准品。
    2.  5×G250 染色液使用前请颠倒 3-5 次混匀, 取 1ml 5×G250 染色液, 加入 4ml 双蒸水, 混匀成 1×G250染色液,此 1×G250 染色液可在 4℃保存一周。
    3.  将标准品按 0,2,4,6,8,12,16,20 微升分别加到 96 孔板中,加 PBS 稀释液补足到 20 微升。
    4.  将样品作适当稀释(好多做几个梯度,如作 2 倍、4 倍、8 倍稀释),加 20 微升到 96 孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线 1/2 后。
    5.  各孔加入 200 微升稀释后的 1×G250 染色液,室温放置 3-5 分钟。
    6.  用酶标仪测定 A595,或 560-610nm 之间的其它波长的吸光度。
    7.  根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。


二.分光光度计法
    如无酶标仪,染色反应可在离心管中进行,反应液混匀后加入比色皿中,使用分光光度计测定吸光值。


步骤如下:
    1.  取八支(或者更多)干净的 10ml 离心管,标记上号。
    2.  取 100ulBSA 加入 PBS 2.4ml 稀释终浓度为 0.2mg/ml。
    3.  5×G250 染色液使用前请颠倒 3-5 次混匀,取 10ml 5×G250 染色液,加入 40ml 双蒸水,混匀成 1×G250 染色液,此 1×G250 染色液可在 4℃保存一周。
    4.  按下表加入试剂(以每孔 5ml 计,多余的用来清洗比色皿)

     5. 反应 3 分钟后测 OD 值。为了实验的准确性,可每间隔 2 分钟加一管染色液,每间隔 2 分钟测一管 OD值。如下表:

 


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蛋白定量试剂Bradford蛋白浓度测定试剂盒

 

 

参考文献:
《Cetuximab and Doxorubicin loaded dextran-coated Fe3O4 magnetic nanoparticles as novel targeted nanocarriers for non-small cell lung cancer》 作者:Qinlu Zhang,Qian Liu,Menghan Du,Yali Cui,Lixia Zhang,Lili Guo,Le Ma,Mingwei Chen, 期刊:Journal of Magnetism and Magnetic Materials 影响因子:3.046 PMID:

《The critical roles of exposed surface residues for the thermostability and halotolerance of a novel GH11 xylanase from the metagenomic library of a saline-alkaline soil》 作者:Zhongyuan,Li,Xiumei Li,Tianhui Liu,Shiheng Chen,Huihui Liu,Hui Wang,Kun Li,Yajian Song,Xuegang Luo,Junqi Zhao,Tongcun Zhang 期刊:International Journal of Biological Macromolecules 影响因子:4.784 PMID:30986455

 

 

 

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