植物硝态氮检测试剂盒 微量法

植物硝态氮含量检测试剂盒说明书
微量法
货号：BC1505
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 试剂一：临用前根据用量每支加入0.5 mL浓硫酸充分溶解。配制好后尽快使用，4℃可保存一周。

2. 标准品：10 mg硝 酸钾，临用前加入0.935 mL蒸馏水溶解，配成1400 μg/mL的NO₃-N标准液。

产品说明：
硝酸盐是植物吸收的主要含氮物质之一。硝酸盐在植物体内的还原部位不同，可以在根内，也可以在枝叶内进行，且因植物类别和环境条件而异。因此，测定植物体内硝态氮含量变化对了解氮代谢机制有重要的意义。
在浓酸条件下，NO₃^-可以与水杨酸反应，生成硝基水杨酸，后者在PH>12的条件下呈黄色，在一定范围内，其颜色深浅与含量成正比，可比色测定计算得硝态氮含量。
技术指标：
低检出限：0.4631 μg/mL
线性范围：3.5-140 μg/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、浓硫酸、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件

注意事项：

1. 试剂一和试剂二均具有强腐蚀性，操作时需做好防护措施。

2. 如果样本吸光值大于1.5，建议将样本用蒸馏水稀释后进行测定。

实验实例：

1. 取0.1g苹果加入1mL蒸馏水进行样本处理，取上清后按照测定步骤操作，使用96孔板测得计算ΔA=A测定-A对照=0.333-0.051=0.282，ΔA标准管=A标准管-A空白管=0.320-0.048=0.272，按样本质量计算含量得：

NO₃^-N含量（μg/g质量）=28×ΔA÷ΔA标准÷W=28×0.282÷0.272÷0.1=290.3 μg/g质量。

1. 取0.1g叶片加入1mL蒸馏水进行样本处理，取上清后按照测定步骤操作，使用96孔板测得计算ΔA= A测定-A对照=0.633-0.458=0.175，ΔA标准管=A标准管-A空白管=0.320-0.048=0.272，按样本质量计算含量得：

NO₃^-N含量（μg/g质量）=28×ΔA÷ΔA标准÷W=28×0.175÷0.272÷0.1=180.1 μg/g质量。
相关发表文献：
[1] Fuyuan Zhu,Moxian Chen,Wailung Chan,et al. SWATH-MS quantitative proteomic investigation of nitrogen starvation in Arabidopsis reveals new aspects of plant nitrogen stress responses. Journal of Proteomics. September 2018;(IF3.537)
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