硝酸还原酶（NR）检测测试盒 氮代谢

产品名称:：  硝酸还原酶(NR)活性检测试剂盒

产品英文名:  Nitrate Reductase（NR）Assay Kit

产品货号：BC0080       产地：北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼

产品规格：50管/24样         产品商标：solarbio
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            参考价格：300
库存状态：现货                          
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简要介绍：
NR广泛存在于植物中，是植物硝态氮转化为氨态氮的关键酶，也是诱导酶，对作物的产量和品质有影响。
   NR催化硝酸盐还原为亚硝酸盐，NO3ˉ+NADH+H＋→NO2ˉ+NAD＋+H2O ；产生的亚硝酸盐能够在酸性条件下，与对氨基ben磺酸及α-萘胺定量生成红色偶氮化合物；生成的红色偶氮化合物在540 nm有大吸收峰，可用分光光度法测定。

产品详细描述
产品内容：
诱导剂储备液：液体50mL×1瓶，4℃保存。
提取液：液体25mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体40mL×1瓶，-20℃保存。
试剂二：液体10mL×1瓶，-20℃保存。
试剂三：液体20mL×1瓶，4℃保存。
试剂四：液体20mL×1瓶，4℃保存。
标准液：NaNO₂标准储备液1mL，10μmol/mL，-20℃保存。
诱导剂应用液的配制：用时将诱导剂储备液稀释10倍，即取10mL诱导剂储备液加90mL蒸馏水，充分混匀。
标准液的配制：将标准储备液用蒸馏水稀释为1.5、1.0、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1μmol/mL 浓度的标准溶液 。
产品说明：
NR（ EC 1.7.1.3）广泛存在于植物中，是植物硝态氮转化为氨态氮的关键酶，也是诱导酶，对作物的产量和品质有影响。
NR催化硝酸盐还原为亚硝酸盐，NO₃ˉ+NADH+H^＋→ NO₂ˉ +NAD^＋+H₂O；产生的亚硝酸盐能够在酸性条件下，与对–氨基ben磺酸α-萘胺定量生成红色偶氮化合物；生成的红色偶氮化合物在540 nm有大吸收峰，可用分光光度法测定。
需自备的仪器和用品:
    可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样品测定的前处理
1、取适量诱导剂于烧杯中，将新鲜标本洗净，滤纸吸干，放入诱导剂应用液中（淹没即可），浸泡2h，取出样本，滤纸吸干后，-20℃冷冻30min，取出样本，滤纸吸干。（根据需要进行诱导处理）
2、称取约0.1g样本，加入1mL提取液，冰浴研磨，4000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。
二、测定步骤
1、分光光度计预热30min以上，调节波长540nm，蒸馏水调零。
2、样本测定（在EP管中加入下列试剂）

混匀后，37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴30min

   混匀，显色20min，4000g 常温离心10min，取上清，540nm下比色，计算A测定-A对照。
   注意：空白管只需测一次。
三、NR活性计算：
1. 标准曲线的绘制：
以标准溶液浓度为x轴，以ΔA（A标准管-A空白管）为y轴绘制标准曲线，得到线性回归方程y=kx+b。将（A测定-A对照）带入方程中，计算出x（μmol/mL）。
2. NR活性的计算：
（1）按样本鲜重计算：
单位定义：每小时每g鲜重样品中催化产生 1μmol NO₂ˉ的量为一个 NR活力单位。
NR（U/g 鲜重）=x×V样品÷(W÷V样总×V样品)÷T= 2x÷W。
（2）按样本蛋白浓度计算：
单位定义：每小时每mg组织蛋白催化产生 1μmol NO₂ˉ的量为一个 NR活力单位。
NR（U/mg prot）=x×V样品÷（V样品×Cpr）÷T=2x÷Cpr。
V样品：吸取样本体积，0.1mL；V样总：加入提取液体积，1mL；T：反应时间，0.5h；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g。

相关文献：
《FIP1 Plays an Important Role in Nitrate Signaling and Regulates CIPK8 and CIPK23 Expression in Arabidopsis》 作者:Chao Wang, Wenjing Zhang, Zehui Li, Zhen Li, Yingjun Bi, Nigel M. Crawford and Yong Wang 期刊:Frontier in Immunology 影响因子:4.716 PMID:
《Knockout of SlSBPASE Suppresses Carbon Assimilation and Alters Nitrogen Metabolism in Tomato Plants》 作者:Fei Ding, Qiannan Hu, Meiling Wang and Shuoxin Zhang 期刊:International Journal of Molecular Sciences 影响因子:4.183 PMID:30558146
《The trehalose-6-phosphate synthase TPS5 negatively regulates ABA signaling in Arabidopsis thaliana》 作者:Lianfu Tian,Zijing Xie,Changqing Lu,Xiaohua Hao,Sha Wu,Yuan Huang,Dongping Li,Liangbi Chen 期刊:Plant Cell Rep. 影响因子:3.499 PMID:30963238

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