谷丙转氨酶（GPT）测试盒 氨基酸代谢

谷丙转氨酶（GPT）测试盒 氨基酸代谢
货号：BC1550
规格：50管/24样
测试方法：可见分光光度法

测定意义
     GPT（EC 2.6.1.2）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化氨基酸和酮酸转氨基反应，在氨基酸代谢中具有重要作用。此外，哺乳动物肝细胞GPT活性很高，当肝细胞坏死，GPT释放到血液中，血清GPT活性显著增高。因此，GPT被世界卫生组织推荐为肝功能损害敏感的检测指标。

测定原理
     GPT催化丙氨酸和α-酮戊二酸发生转氨基反应，生成丙酮酸和谷氨酸；加入2,4-二硝基苯肼溶液，不仅终止上述反应，而且与酮酸中的羰基加成，生成丙酮酸苯腙；苯腙在碱性条件下呈红棕色，可以在505nm读取吸光值并计算酶活力。

试剂的组成和配制
提取液：30mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 5 mL×1 瓶， 4℃保存；
试剂二：液体 5 mL×1 瓶， 4℃保存；
试剂三：液体 50 mL×1 瓶，4℃保存；

样品测定的准备
1、细菌、细胞或组织样品的制备：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量
（10 4 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，
加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。

测定操作表 ：
1、 分光光度计预热 30min 以上，调节波长 505nm，蒸馏水调零。
2、 在 EP 管中加入下列试剂

计算
1、以相对吸光值（A 测定管-A 对照管）为横坐标，相应酶活力单位（U/L）为纵坐标。作
标准曲线为：y=（605.07χ2+192.86χ+0.1392）×0.482
2、血清中 GPT 活力(U/L)= 0.482×（605.07χ2+192.86χ+0.1392）。χ 为 A 测定管-A 对照管。
3、微生物、细胞或组织中 GPT 活力(U/g 蛋白)=0.482×（605.07χ2+192.86χ+0.1392）÷待测匀浆蛋白浓度（g/L）。χ 为 A 测定管-A 对照管。

相关文献：

《Hydroxychloroquine induced lung cancer suppression by enhancing chemo-sensitization and promoting the transition of M2-TAMs to M1-like macrophages》 作者:Yong Li, Fengjun Cao, Mingxing Li, Pindong Li, Yuandong Yu, Longchao Xiang, Tao Xu, Jinhua Lei, Yun Yan Tai, Jianyong Zhu, Bingbing Yang, Yingpin Jiang, Xiufang Zhang, Long Duo, Ping Chen & Xiongjie Yu  期刊:Journal of Experimental & Clinical Cancer Research 影响因子:5.646 PMID:30373678
 

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