品牌 | SOLARBIO/索莱宝 | CAS | 详询 |
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分子式 | 详询 | 纯度 | 详询 |
分子量 | 详询 | 货号 | BC1550 |
规格 | 50管/24样 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 谷丙转氨酶活性测定 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农业,综合 |
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
提取液 | 液体30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂一 | 粉剂×2支 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 液体8 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂三 | 液体80 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
标准液 | 液体1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
产品说明:
谷丙转氨酶又叫丙*酸氨基转移酶(EC 2.6.1.2),广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化氨基酸和酮酸转氨基反应,在氨基酸代谢中具有重要作用。此外,哺乳动物肝细胞GPT活性很高,当肝细胞坏死,GPT释放到血液中,血清GPT活性显著增高。因此,GPT被世界卫生组织推荐为肝功能损害最敏感的检测指标。
GPT催化丙*酸和α-酮戊二酸发生转氨基反应,生成丙酮酸和谷*酸;加入2,4-二硝*肼溶液,不仅终止上述反应,而且与酮酸中的羰基加成,生成丙酮酸苯腙;苯腙在碱性条件下呈红棕色,可以在505nm读取吸光值并计算酶活力。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料"附件
实验实例:
取0.1g兔子肝脏组织加入1mL提取液进行匀浆研磨,取上清后再按照测定步骤操作,测得A测定管=1.181,A对照管=0.458,计算∆A =A测定管-A对照管=1.181-0.458=0.723,带入标准曲线y=0.5286x+0.0362,计算x=(0.723-0.0362)÷0.5286=1.299,按样本质量计算酶活得:
GPT活性(U/g质量)=12x÷W=12×1.299÷0.1=155.88 U/g质量。
取兔血清直接检测,测得A测定管=0.514,A对照管=0.383,计算∆A=A测定管-A对照管=0.514-0.383=0.131,带入标准曲线y=0.5286x+0.0362,x=(0.131-0.0362)÷0.5286=0.179,按血清(浆)体积计算酶活得:
GPT活性(U/mL)=12x=12×0.179=2.148 U/mL。
参考文献:
Zhao W, Wei H. Effects of cadmium on transaminase activities and structures of tissues in freshwater giant prawn (Macrobrachium rosenbergii) [J]. Journal of Fisheries of China, 1995,19(001):21-27.
Ohgami N, Upadhyay S, Kabata A, et al. Determination of the activities of glutamic oxaloacetic transaminase and glutamic pyruvic transaminase in a microfluidic system[J]. Biosensors and Bioelectronics, 2007, 22(7): 1330-1336.
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