品牌 | SOLARBIO/索莱宝 | CAS | 详询 |
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分子式 | 详询 | 纯度 | 详询 |
分子量 | 详询 | 货号 | BC1140 |
规格 | 50管/48样 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 测定意义:CK(EC 2.7.3.2)主要存在于心脏、肌肉以及脑等组织中,能可逆 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农业,综合 |
肌酸激酶(CK)活性检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC1140
规格:50T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
提取液 | 液体60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂一 | 粉剂×1瓶 | -20℃保存 |
试剂二 | 粉剂×1支 | -20℃保存 |
试剂三 | 粉剂×2支 | -20℃保存 |
试剂四 | 粉剂×2支 | -20℃保存 |
试剂五 | 液体15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
试剂一:临用前加10 mL蒸馏水溶解;用不完的分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
试剂二:临用前加入0.5 mL蒸馏水溶解;用不完的分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
试剂三:临用前取1支加入0.5 mL蒸馏水溶解;用不完的分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
试剂四:临用前加入0.65 mL蒸馏水溶解;用不完的分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
工作液:临用前根据用量将试剂一、试剂二、试剂三、试剂四、试剂五以70:4:7:10:90的比例混合(体积比)。现用现配。使用前室温孵育20min(该步骤不可省略)。
产品说明:
肌酸激酶(Creatine Kinase,CK) (EC 2.7.3.2)也成为肌酸磷酸激酶,主要存在于心脏、肌肉以及脑等组织中,能可逆地催化肌酸与ATP之间的转磷酰基反应,是一个与细胞能量运转、肌肉收缩、ATP再生有直接关系的重要激酶。
CK催化磷酸肌酸和ADP生成肌酸和ATP,己糖激酶催化ATP与葡萄糖形成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化6-磷酸葡萄糖与NADP+生成NADPH,导致340nm光吸收值增加,以此来表示CK酶活。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
天平、低温离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、恒温水浴锅、研钵/匀浆器、蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料"附件
注意事项:
血清的CK不稳定,采集样本后尽快测定,4℃避光保存可稳定24h。
样本蛋白质含量需要另外测定。
OD 值大于0.6可用提取液适当稀释样本,并在计算公式中相应的改变稀释倍数。
ΔA空白管一般不超过0.01。
实验实例:
取0.1g小鼠脑加入1mL提取液进行匀浆研磨,取上清后再用提取液稀释4倍,之后按照测定步骤操作,用1mL石英比色皿测得计算ΔA测定管=A2测定-A1测定=0.638-0.149=0.489,ΔA空白管=A2空白-A1空白=0,ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.489-0=0.489,按组织样本质量计算酶活得:CK活性(U/g 质量)=268×ΔA÷W×4(稀释倍数)=268×0.489÷0.1×4(稀释倍数)=5242.08 U/g 质量。
取鸭血清200μL,按照测定步骤操作,测得计算ΔA测定管=A2测定-A1测定=0.445-0.423=0.022,ΔA空白管=A2空白-A1空白=0,ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.022-0=0.022,按血清体积计算酶活得:CK活性(U/mL)=268×ΔA=268×0.022=5.896 U/mL。
相关发表文献:
Defang Li, Ning Lu, Jichun Han,et al. Eriodictyol Attenuates Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury through the Activation of JAK2. Frontiers in Immunology. January 2018;(IF3.845)
Xu Y, Meng X, Hou X, et al. A mutant of the Buthus martensii Karsch antitumor-analgesic peptide exhibits reduced inhibition to hNav1. 4 and hNav1. 5 channels while retaining analgesic activity[J].Journal of Biological Chemistry, 2017, 292(44): 18270-18280
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