品牌 | SOLARBIO/索莱宝 | CAS | 详询 |
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分子式 | 详询 | 纯度 | 详询 |
分子量 | 详询 | 货号 | BC2010 |
规格 | 50T/48S | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 测定意义:TC 包括游离胆固醇和胆固醇酯。TC 是指组织中所有脂蛋白所含胆固醇之 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农业,综合 |
乙醇酸氧化酶(GO)活性检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
货号:BC2010
规格:50T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
提取液 | 液体60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂一 | 液体40 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 粉剂×2瓶 | -20℃保存 |
试剂三 | 液体6 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
试剂二:临用前加入6 mL蒸馏水溶解,用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
产品说明:
乙醇酸氧化酶(EC1.1.3.15)是乙醇酸循环中的一种酶,也是植物光呼吸代谢中的关键酶,催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,通过测定乙醇酸氧化酶活性,可以了解植物光合和呼吸代谢的基本方法。
乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,乙醛酸和*反应生成乙醛酸苯腙,在324nm有特征吸收峰。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、低温离心机、可调式移液枪、1mL石英比色皿、天平、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料"附件
注意事项:
测定之前进行预实验,若吸光值A1>1,请将样本用提取液进行适当的稀释再测定,并在计算公式中乘以稀释倍数。
色素含量较高的样本,可在提取酶时加活性炭吸附。
空白管为检测各试剂组分质量的检测孔,正常情况下,其OD值变化不超过0.02。
实验实例:
称取约0.1g三叶草组织,加入1mL提取液,进行冰浴匀浆,然后10000g,4℃,离心10min,取上清进行检测,测得ΔA测定管=A2测定-A1测定=0.868-0.773=0.095,ΔA空白管=A2空白-A1空白=0.027-0.013=0.014,ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.095-0.014=0.081,按样本质量计算酶活得:
GO酶活(U/g 质量)=392.16×ΔA÷W=317.6496 U/g 质量。
称取约0.1g菠菜组织,加入1mL提取液,进行冰浴匀浆,然后10000g,4℃,离心10min,取上清稀释2倍进行检测,测得ΔA测定管=A2测定-A1测定=0.873-0.778=0.095,ΔA空白管=A2空白-A1空白=0.027-0.013=0.014,ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.095-0.014=0.081,按样本质量计算酶活得:
GO酶活(U/g 质量)=392.16×ΔA÷W×2(稀释倍数)=635.2992 U/g 质量。
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