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  • 3-磷酸甘油醛脱氢酶活性检测试剂盒 微量法
  • 3-磷酸甘油醛脱氢酶活性检测试剂盒 微量法
产品名称:

3-磷酸甘油醛脱氢酶活性检测试剂盒 微量法

产品品牌: SOLARBIO/索莱宝 价格:
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2024-04-11
储存条件
-20℃
中文名称
3-磷酸甘油醛脱氢酶活性检测试剂盒 微量法
有效期
6个月
单位

推荐
若使用96孔板测定,需使用96孔UV板,推荐货号YA0602
英文名称
Glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogenase(GAPDH) Activity Assay Kit
别名
3-磷酸甘油醛脱氢酶试剂盒 GAPDH Kit 3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAP

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝CAS详询
分子式详询纯度详询
分子量详询货号BC2215
规格100T/96S供货周期现货
主要用途测定意义:GAPDH催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸,是糖酵解途径应用领域环保,化工,生物产业,农业,综合


3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)活性检测试剂盒说明书
微量法
货号: BC2215
规格:100T/96S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件
提取液液体100 mL×1瓶2-8℃保存
试剂一粉剂×1瓶-20℃保存
试剂二液体20 mL×1瓶2-8℃保存
试剂三液体12 µL×1瓶2-8℃保存
溶液的配制:
  1. 试剂三:液体置于试剂瓶内EP管中。根据用量按照试剂三:蒸馏水为3:100的体积比例充分混匀,现用现配;

  2. 工作液的配制:将试剂二全部倒入试剂一瓶中,充分溶解,根据需要取一定的量37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热10min;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

产品说明:
GAPDH(EC1.2.1.12)催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸,是糖酵解途径的关键酶,与糖异生途径、体内血糖浓度的维持和糖尿病的发生密切相关,在机体糖、脂、蛋白代谢紊乱疾病中发挥重要作用。
3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3-二磷酸甘油酸。GAPDH逆向催化1,3-二磷酸甘油酸和NADH生成3-磷酸甘油醛、无机磷和NAD+,340nm处测定NADH的减少量可反映GAPDH活性的高低。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、微量石英比色皿/96孔UV板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料"附件
注意事项:
  1. 当A1小于0.8或ΔA大于0.7时(96孔板为A1小于0.4或ΔA大于0.4),建议将样本稀释后再进行测定。

  2. 空白管为检测各试剂组分质量的检测孔,正常情况下,变化不超过0.02。

实验实例:
  1. 取0.1g兔肾脏加入1mL提取液,进行冰浴匀浆,然后8000g,4℃,离心20min,取上清置冰上,之后按照测定步骤操作,用微量石英比色皿测得计算ΔA测定管= A1测定-A2测定=0.9333-0.2289=0.7044,ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.9322-0.9274=0.0048,ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.6996,按样本质量计算酶活得

GAPDH酶活(U/g质量)=1072×ΔA÷W=7499.7 U/g质量。
  1. 取0.1g三叶草加入1mL提取液,进行冰浴匀浆,然后8000g,4℃,离心20min,取上清置冰上,之后按照测定步骤操作,用微量石英比色皿测得计算ΔA测定管=A1测定-A2测定=1.0184-1.0042=0.0142,ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.9322-0.9274=0.0048,ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.0094,按样本质量计算酶活得:

GAPDH酶活(U/g质量)=1072×ΔA÷W=100.77 U/g质量。
  1. 取兔血清直接检测,用微量石英比色皿测得计算ΔA测定管=A1测定-A2测定=0.9528-0.9303=0.0225,ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.9322-0.9274=0.0048,ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.0177,按血清(浆)体积计算酶活得:

GAPDH酶活(U/mL)=1072×ΔA=18.974 U/mL。
相关系列产品:
BC0990/BC0995 植物叶绿素含量检测试剂盒
BC4330/BC4335 植物类胡萝卜素含量检测试盒
 

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