酸性蛋白酶（ACP）活性检测试剂盒 微量法

酸性蛋白酶（ACP）活性检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC2285
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 试剂二：临用前加入4 mL试剂五，沸水浴中搅拌溶解；

2. 标准品：20μmol/mL标准酪*酸。

产品说明：
ACP是一种在酸性环境下催化蛋白质水解的酶。该酶主要用于酒精发酵、啤酒酿造、毛皮软化、果酒澄清、酱油酿造、饲料等。
    酸性条件下，ACP催化酪蛋白水解产生酪*酸；在碱性条件下，酪*酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝；钨蓝在680nm有特征吸收峰，通过测定其吸光度增加，来计算ACP活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
研钵/匀浆器、台式离心机、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、1.5 mL EP管、冰、蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件
注意事项：
若反应较弱，（A测定-A对照）差值较小，可适当延长反应时间（20-30min），即第一步水浴时间，最后计算酶活时对公式进行修改。
实验实例：

1. 取0.1g小鼠肝脏加入1mL提取液冰上充分研磨，10000rpm 4℃离心10min，取上清，置冰上，之后按照测定步骤操作，使用96孔板测得计算A测定=0.303，A对照=0.271，A标准=0.253，A空白=0.044，按样本质量计算酶活得：ACP活性（U/g 质量）=0.125×（A测定-A对照）÷（A标准-A空白）÷W=0.191 U/g 质量。

相关发表文献：

1. Xin-Bin, Gu, Xin, et al. Hematopoietic Substrate-1-Associated Protein X-1 Regulates the Proliferation and Apoptosis of Endothelial Progenitor Cells Through Akt Pathway Modulation[J]. Stem Cells, 2017. (IF 5.614)

2. Shijun Wang, Yunfei Cao, Zuqing Yang, et al. MicroRNA-93-5p increases multidrug resistance in human colorectal carcinoma cells by downregulating cyclin dependent kinase inhibitor 1A gene expression. Oncology Letters. December 2016. (IF 1.874)

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