纤维素酶(CL)活性检测试剂盒 微量法

纤维素酶（CL）活性检测试剂盒说明书
微量法
货号：BC2545
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：
标准品：10mg无水*萄糖（干燥失重<0.2%）。临用前加入1mL蒸馏水溶解，配制成10mg/mL葡萄糖溶液备用，2-8℃保存两周，或者用饱和苯甲酸溶液溶解，可保存更长时间。
产品说明：
CL（EC 3.2.1.4）存在于细菌、真菌和动物体内，能够催化纤维素降解，是一类可广泛应用于医药、食品、棉纺、环保及可再生资源利用等领域的酶制剂。
采用3,5-二硝基水杨酸法测定CL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、低温离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

1. 细菌或细胞：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每500万细菌或细胞加入1mL提取液，超声冰浴破碎细菌或细胞（功率200w，超声3秒，间隔10秒，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2. 组织：称取约0.1g组织加入1mL提取液，冰浴中匀浆。8000g ，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

二、测定步骤
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至540nm，分光光度计蒸馏水调零。
2、标准品的准备：将标准品用蒸馏水稀释至1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0mg/mL。
 

实验中每个标准管需15µL标准溶液。
3、加样表（在EP管中依次加入下列试剂）： 

相关发表文献：
Guo Q, Du G, Qi H, et al. A nematicidal tannin from Punica granatum L. rind and its physiological effect on pine wood nematode (Bursaphelenchus xylophilus)[J]. Pesticide biochemistry and physiology, 2017, 135: 64-68.
参考文献：
Faria M L, Kolling D, Camassola M, et al. Comparison of Pennicillium echinulatum and Trichoderma reesei cellulases in relation to their activity against various cellulosic substrates[J]. Biores. Technol, 2008, 99: 1417-1424.
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