土壤酸性转化酶（S-AI）活性检测试剂盒

土壤酸性转化酶（S-AI）活性检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC3075
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 试剂二：临用前取1瓶加入5 mL试剂一充分溶解备用，用不完的试剂2-8℃保存2周；

2. 标准品：10 mg无水*萄糖。临用前加入1 mL试剂一充分溶解，制备10 mg/mL葡萄糖标准溶液待用2-8℃保存两周。

产品说明：
S-AI在pH为4.5~5.0（酸性）条件下催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖，是土壤微生物蔗糖代谢关键酶之一。S-AI催化蔗糖降解产生还原糖，进一步与 3,5-二硝基水杨酸反应，生成棕红色氨基化合物，在540nm有特征光吸收，在一定范围内540nm光吸收增加速率与S- AI活性成正比。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、恒温培养箱/水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、蒸馏水、30-50目筛、冰、甲苯（不允许快递）。

操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件

注意事项：
1、如果加入试剂三，煮沸10min后有混浊物出现，建议离心除去沉淀（10000rpm，2min），取上清测定吸光度；
2、如果吸光值大于1，可以将上清液再进行稀释；若吸光值较小，可以减少上清液稀释倍数。两种操作均要注意改变公式中的稀释倍数。
实验实例：

1. 取两管0.02g林土，即为测定管和对照管，按照测定步骤操作，记为A测定管、A对照管。用96孔板测得计算ΔA测定=A测定管-A对照管=0.278-0.066=0.212，标准曲线：y=3.6249x-0.1862，x=0.1099，计算酶活得：

S-AI（U/g 土样）=3.84×x÷W=3.84×0.1099÷0.02=21.1008 U/g 土样。

1. 取两管0.02g林土，即为测定管和对照管，按照测定步骤操作，记为A测定管、A对照管。用96孔板测得计算ΔA测定=A测定管-A对照管=0.272-0.066=0.206，标准曲线：y=3.6249x-0.1862，x=0.1082，计算酶活得：

S-AI（U/g 土样）=3.84×x÷W=3.84×0.1082÷0.02=20.7744 U/g 土样。
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