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植物蔗糖酶检测试剂盒 微量法
产品简介:

储存条件
2-8℃
植物蔗糖酶检测试剂盒 微量法
有效期
6个月
单位

英文名称
Plant Invertase Activity Assay Kit
检测方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
规格
100T/48S

产品型号:BC0135-100T/48S

更新时间:2024-04-12

厂商性质:生产厂家

访 问 量 :736

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产品介绍


植物蔗糖酶活性检测试剂盒说明书
微量法
货号: BC0135
规格: 100T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件
提取液液体60 mL×1瓶2-8℃保存
试剂一液体2 mL×1瓶2-8℃保存
试剂二粉剂×12-8℃保存
试剂三液体4 mL×1瓶常温保存
标准品粉剂×12-8℃保存
溶液的配制:
  1. 试剂二:用时加入1 mL蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂 2-8℃保存一周;

  2. 标准品:用时加入1 mL蒸馏水充分溶解制备10 mg/mL葡萄糖标准溶液待用;用不完的试剂2-8℃保存一周。

产品说明:
蔗糖酶(EC 3.2.1.26)是碳水化合物消化吸收的关键酶之一,能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收。
本试剂盒采用3,5-二硝基水杨酸法测定蔗糖酶催化产生的还原糖的含量,由此可得出蔗糖酶水解速度。其原理是3,5-二硝基水杨酸与还原糖共热被还原成棕红色的氨基化合物,在一定范围内还原糖的量和反应液的颜色深度成正比。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料"附件
一、样本处理可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献
按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
二、测定步骤
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 540nm,蒸馏水调零。
2、标准品的制备:
将标准品用蒸馏水稀释至2.5、21.510.80.60.40.20mg/mL0mg/mL为空白管)。
3、加样表(在EP管中依次加入下列试剂):
试剂名称(μL对照管测定管标准管
试剂一151515
蒸馏水15--
 
样本3030-
标准品--30
试剂二-1515
置于25℃准确水浴 10min
试剂三303030
混匀,100℃水浴 10min 左右(盖紧,防止水分散失),冷却至室温
蒸馏水210210210
混匀,取200μL至微量玻璃比色皿或96孔板中测定各管540nm吸光值,ΔA=A 测定管-A对照管。(每个测定管需设一个对照管

注意事项:
当A大于1.2时,建议将样本用提取液稀释后进行测定。
参考文献:
  1. Karley A J, Ashford D A, Minto L M, et al. The significance of gut sucrase activity for osmoregulation in the pea aphid, Acyrthosiphon pisum[J]. Journal of insect physiology, 2005, 51(12): 1313-1319.

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