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专注于生物学试剂及试剂盒领域
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产品型号：BC4020-50T/24S
更新时间：2024-04-12
厂商性质：生产厂家
访 问 量 ：723
010-50973130
产品分类
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土壤亮*酸氨基肽酶（S-LAP）活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC4020
规格：50T/24S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 试剂一 | 液体50 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×2瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
试剂二：临用前取1瓶加入3 mL丙 酮溶解，用不完的试剂2-8℃保存一周。
产品说明：
S-LAP是一类能水解肽链N-末端为亮*酸的酶，由土壤微生物分泌。S-LAP活性变化与机体某些病理状态密切相关。
S-LAP分解L-亮*酸对硝基 苯胺生成对硝基 苯胺，后者在405nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算S-LAP活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、天平、离心机、水浴锅、研钵、甲苯（不允许快递）、丙 酮（不允许快递）、30-50目筛、蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
取新鲜土样自然风干或37℃烘干，过30-50目筛。
二、测定步骤
分光光度计预热30min以上，波长调至405nm，蒸馏水调零。
加样表：
| 测定管 | 对照管 | |
| 风干土样（g） | 0.1 | 0.1 |
| 甲苯（μL） | 50 | 50 |
| 震荡混匀，室温静置15min。 | ||
| 试剂一（μL） | 850 | 850 |
| 试剂二（μL） | 100 | - |
| 置于30℃水浴锅准确反应1h后，立刻煮沸5min（盖紧，缠封口膜，防止崩开水分散失）。流水冷却至室温。 | ||
| 试剂二（μL） | - | 100 |
| 14000g，常温离心10min，取上清于405nm处测定吸光值，分别记为A测定管、A对照管，计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管需设一个对照管。 | ||
实验实例：
称取两管0.1g三叶草土样，分别记为测定管和对照管，按照测定步骤操作，计算ΔA=A测定管-A对照管=0.982-0.223=0.759，计算酶活得：S-LAP活性（U/g土样）=1.689×ΔA÷W=1.689×0.759÷0.1=12.8195 U/g土样。
称取两管0.1g土样，分别记为测定管和对照管，按照测定步骤操作，计算ΔA=A测定管-A对照管=0.812-0.141=0.671，计算酶活得：S-LAP活性（U/g土样）=1.689×ΔA÷W=1.689×0.671÷0.1=11.3332 U/g土样。
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