品牌 | SOLARBIO/索莱宝 | CAS | 详询 |
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分子式 | 详询 | 纯度 | 详询 |
分子量 | 详询 | 货号 | BC4020 |
规格 | 50T/24S | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 土壤亮*酸氨基肽酶(S-LAP)活性检测 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,综合 |
土壤亮*酸氨基肽酶(S-LAP)活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC4020
规格:50T/24S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
试剂一 | 液体50 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 粉剂×2瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
试剂二:临用前取1瓶加入3 mL丙 酮溶解,用不完的试剂2-8℃保存一周。
产品说明:
S-LAP是一类能水解肽链N-末端为亮*酸的酶,由土壤微生物分泌。S-LAP活性变化与机体某些病理状态密切相关。
S-LAP分解L-亮*酸对硝基 苯胺生成对硝基 苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算S-LAP活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、天平、离心机、水浴锅、研钵、甲苯(不允许快递)、丙 酮(不允许快递)、30-50目筛、蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料"附件
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
取新鲜土样自然风干或37℃烘干,过30-50目筛。
二、测定步骤
分光光度计预热30min以上,波长调至405nm,蒸馏水调零。
加样表:
测定管 | 对照管 | |
风干土样(g) | 0.1 | 0.1 |
甲苯(μL) | 50 | 50 |
震荡混匀,室温静置15min。 | ||
试剂一(μL) | 850 | 850 |
试剂二(μL) | 100 | - |
置于30℃水浴锅准确反应1h后,立刻煮沸5min(盖紧,缠封口膜,防止崩开水分散失)。流水冷却至室温。 | ||
试剂二(μL) | - | 100 |
14000g,常温离心10min,取上清于405nm处测定吸光值,分别记为A测定管、A对照管,计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管需设一个对照管。 |
实验实例:
称取两管0.1g三叶草土样,分别记为测定管和对照管,按照测定步骤操作,计算ΔA=A测定管-A对照管=0.982-0.223=0.759,计算酶活得:S-LAP活性(U/g土样)=1.689×ΔA÷W=1.689×0.759÷0.1=12.8195 U/g土样。
称取两管0.1g土样,分别记为测定管和对照管,按照测定步骤操作,计算ΔA=A测定管-A对照管=0.812-0.141=0.671,计算酶活得:S-LAP活性(U/g土样)=1.689×ΔA÷W=1.689×0.671÷0.1=11.3332 U/g土样。
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