土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶活性测试盒

土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG）活性检测试剂盒说明书



可见分光光度法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC4000
规格：50T/24S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 试剂二：临用前取1瓶加入4 mL蒸馏水溶解，用不完的试剂-20℃分装保存4周；

2. 标准品：5 mmol/L的对硝基 苯* 溶液。

产品说明：
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG）是土壤微生物分泌的溶酶体中的一种酸性水解酶。其活性变化与机体某些病理状态密切相关。
S-NAG分解对硝基 苯β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝基 苯*，后者在400nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算NAG活性。


注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、30-50目筛、蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件
注意事项：
当ΔA大于1时，建议将上清液稀释后进行测定；当ΔA小于0.02时，建议延长反应时间。计算公式中注意乘以稀释倍数或注意反应时间变化。
实验实例：

1. 取两管0.1g三叶草土，即为测定管和对照管，按照测定步骤操作，记为A测定管、A对照管。计算ΔA测定=A测定管-A对照管=0.509-0.434=0.075，ΔA标准=A标准管-A空白管=0.604-0.002=0.602，计算酶活得：S-NAG活力（U/g 土样）=1.44×ΔA测定÷ΔA标准÷W=1.44×0.075÷0.602÷0.1=1.79402 U/g 土样。

2. 取两管0.1g林土样，即为测定管和对照管，按照测定步骤操作，记为A测定管、A对照管。计算ΔA测定=A测定管-A对照管=0.574-0.497=0.077，ΔA标准=A标准管-A空白管=0.604-0.002=0.602，计算酶活得：S-NAG活力（U/g 土样）=1.44×ΔA测定÷ΔA标准÷W=1.44×0.077÷0.602÷0.1=1.84186 U/g 土样。

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